定量live-cell分析培养条件的优化和评价人类诱导多能干细胞的神经元细胞的健康
研究人类疾病的主要限制影响神经系统是文化的能力,监控和分析神经元细胞准确地代表人类这些疾病的表型。人类诱导多能干细胞的使用(hiPSC)中神经元建模提供了一种新方法旨在神经系统疾病。长期监测神经元形态学和细胞健康文化是这些小说的表征和评价模型的关键系统。传统方法依赖于需要免疫化学染色的端点检测和成像技术,缺乏实时动态信息。
这提出了一个责任当学习模型的神经系统神经网络的完整性被破坏,神经反应的动态复杂性和功能丢失时使用这些类型的方法。对于这些模型系统,持续的实时监控提供了一个显著的优势,它提供了更多的生理神经细胞行为的相关图片,允许非侵入性,重复测量随着时间的推移,相同的神经网络,使罕见的捕获或瞬态事件,往往错过了端点检测。
在这个应用程序中,我们将描述方法和目前的验证数据突显出最佳培养条件评价细胞生存能力和神经突产物在hiPSCderived神经元细胞动态国际(CDI, iCell神经元)。我们还监测神经突产物和细胞生存能力在iCell Gluta神经元从使用定量CDI, live-cell成像和分析方法与IncuCyte®S3 /天/周在96 -微型板块文化。例证了一种实时成像和分析方法使用hiPSCderived神经元,我们评估神经会引起使用IncuCyte®S3阶段/多路复用荧光NeuroTrack应用膜联蛋白V试剂。这些化验轮廓最优培养条件例如iPSC-derived神经系统和演示的能力IncuCyte方法实时、长期定量分析iPSC-derived神经元细胞的健康。
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