6基本实验室安全规则
实验室是一个思想被概念化和物质化成新奇发现的地方。由于实验室拥有大量复杂的设备和危险化学品,因此在进入设施时,必须有人优先考虑安全措施。实验室根据其构成的危险被分为不同的生物安全级别——1级、2级、3级和4级。1级和2级通常分配给实验室,这些实验室使用的药剂造成最小到中等危害,例如大肠杆菌,枯草芽孢杆菌,金黄色葡萄球菌和恶性疟原虫.3级和4级被分配到与具有严重危险的制剂合作的设施,这些制剂可能是致命的。这些因素包括结核分枝杆菌埃博拉病毒和尼帕病毒。
不管实验室的生物安全水平如何,对一个人来说,始终确保安全第一是很重要的。这包括最低限度地使用适当的个人防护装备。你总是可以重复一个实验,但如果你受伤了,就不能这样做了。本指南概述了一些可以采取的预防措施,以确保实验室的安全。
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一般实验室安全措施,设置和人体工程学
在实验室工作之前,接受适当的培训是很重要的,这样你就可以了解实验室的总体布局和适当的安全措施。常用的安全措施包括穿戴适当的个人防护装备(PPE),如实验室外套和手套,间歇测试洗眼液和淋浴,确定泄漏包、急救包和紧急出口的位置,同时熟悉消防出口路线。与此相关的是,无论你有多渴,请不要喝水槽里的蒸馏水!
为确保有一个有利的工作环境,实验室的地面应保持整洁,没有障碍物;避免把箱子放在地板上,因为它们可能会对过路人造成伤害。同样地,清理地板上松散的针尖或微型喷雾针尖,因为你可能不小心踩到它们并滑倒。此外,避免将玻璃器皿放在实验室工作台的外角,因为它们很容易被打翻,破碎的玻璃器皿会产生玻璃碎片,对人造成伤害。
较少提及的安全措施是实验室人体工程学的正确实践。长时间的站立会伤害你的背部,因此当你一次准备很多样品时,坐得舒服是很重要的。例如,当你在几个96孔板中准备样品时,坐下来调整你的椅子,同时保持直立,有支撑的位置。同样,在搬运大容量离心机的重型转子时,弯曲膝盖来搬运它们,这样就不会有一个10公斤重的物体在你的背部施加力;在这种情况下,也建议穿钢头靴。记得在你的实验室工作期间喝水休息,因为无论你一天有多忙,你都必须保持水分。
处理化学品和配制试剂
在实验室里熟悉了之后,你就可以开始做一些实验了。在此之前,您必须准备实验室溶液,为特定的生化反应和细胞生长提供最佳条件。例如,当处理依赖ATP的蛋白质时,试剂通常应该含有氯化钠或氯化钾(用于维持蛋白质功能)、DTT(用于防止二硫键的形成)、甘油(用于防止蛋白质聚集)和镁(作为ATP水解的辅助因子)。因此,了解与处理这些化学物质相关的潜在危险是很重要的。
仔细阅读材料安全数据表(MSDS),了解化学品构成的危害类型。这些化学品可能是有毒的(如:二甲基亚砜)、致癌的(如:溴化乙锭)、易燃的(如:甲醇)或腐蚀性的(如:盐酸)。知道如何储存这些化学物质是很重要的,因为不小心储存是危险的;设有安全柜,用于储存易燃、腐蚀性或有毒化学品。你还需要知道如果你接触到这些化学物质应该怎么做。例如,如果你接触了丙烯酰胺(一种神经毒素),你必须用自来水冲洗受感染的部位至少15分钟。
现在,让我们戴上手套,拿一些肖特瓶,准备实验室溶液!永远记住你所使用的每种化学物质的性质。以考马斯亮蓝或Western Blot染色溶液为例。在准备这些溶液时,你必须处理甲醇,这是一种容易燃烧的有机化学品。由于这种化学物质会释放有毒烟雾,建议你在通风柜中准备含甲醇的溶液。当使用SDS粉末制作原液时,记得戴上口罩,因为SDS粉末挥发性很强,有毒。
制作试剂后,清理工作台和称量机。这样可以去除可能危害同事健康的残留化学物质。总是在瓶子上贴上标签,让你的同事知道试剂的所有内容:至少包括每种化学物质在溶液中的浓度,溶液的制作日期,有效期和你的名字。
处理生物材料(例如细胞和老鼠)
通常,当涉及到药物发现工作时,您将不得不在细菌或人类细胞中生成重组蛋白,用于使用生化分析进行功能研究。在进行细菌培养和人体细胞培养时,一定要戴上手套,并尽量把实验服的袖子塞进手套里;这将充分保护你的手腕,并避免意外打翻细胞培养物。在与病毒打交道时(如制备病毒和病毒转导期间),建议您多戴一层手套。对您来说,通风柜使用后至少用紫外线灯处理30分钟也是很重要的。这将确保在让另一个人使用引擎盖之前,所有残留的病毒或病毒颗粒都被杀死。
为了获得用于DNA提取或检测内源性特定蛋白质水平的细胞,通常通过离心收集细胞。收集细胞颗粒后,不要将上清液丢弃到水槽中。相反,将上清液转移到另一个容器中,用高压灭菌器加热或用漂白剂处理,以确保上清液中所有剩余的细胞都被杀死。然后,可以将处理过的上清液倒入水槽中。同样地,用漂白剂处理用过的组织培养板,然后再将它们扔进生物危害箱。
如果您需要使用鼠标模型,请参加适当的培训,以了解如何正确操作鼠标。避免刺激老鼠,因为这个动作可能会导致它抓伤或咬你。如果你要剪老鼠尾巴进行基因分型研究,完成任务后一定要确保工作表面消毒。当处理生物材料(包括细胞)时,总是用80% (v/v)乙醇/水消毒工作表面。
搬运实验室设备
要进行实验,了解每件设备的标准操作程序(SOP)以确保您知道它们是如何工作的是很重要的。例如,在开始旋转之前,确认离心机是平衡的是很重要的。不平衡的离心机会导致强烈的振动,这可能导致转子崩溃或对用户造成伤害。当你使用大容量离心机时,要采取额外的预防措施。
从实验室烤箱或高压灭菌器中取出热玻璃器皿时,戴上厚手套是很重要的。当你取出装有热的熔化琼脂糖的锥形瓶时,也需要厚手套。此外,记住锥形烧瓶的喷口要远离你的脸。在长时间使用声纳溶解细胞或破坏材料时,请确保您使用了听力保护装置,因为声纳产生的声波会损伤您的耳朵。
实验工作——很多事情都可能出错
在不伤到自己的情况下把试剂和样本准备好了吗?恭喜你!现在,你已经准备好进行一些突破性的实验了。但是,在使用示例时,有一些事情需要注意。当您将用过的移液管头扔进生物危害箱时,请确保您小心这样做。你肯定不希望给坐在对面的同事不合理的小费吧!
在进行细菌接种时,请确保不要被本生灯的火焰或热琼脂板播散器烫伤。在用盛有酒精的烧杯消毒之前,请确保酒精不是绝对的。酒精是一种高度可燃的化学物质,如果制作不当,当酒精接触到热喷雾器时就会燃烧。如果发生这种情况,你需要冷静下来,认真思考——“我怎样才能阻止火焰?”记住,当有氧气供应时,燃烧就会发生。你能做的就是迅速用铝箔盖住烧杯,切断氧气供应。这样做,火焰就会熄灭。
当使用紫外线观察DNA凝胶时,要确保你的手腕被实验室外套的袖子保护着。此外,确保你的眼睛不受紫外线的伤害。当你用锋利的手术刀从DNA凝胶上切下一条带子时,请小心,因为你很容易不小心割伤自己。与DNA样品不同,蛋白质样品在使用SDS- PAGE分析之前必须煮沸。如有必要,使用镊子将蛋白质样本从加热块(可达100°C)中取出,以避免灼伤手指。对于DNA和蛋白质分析,始终确保运行缓冲液是正确的,以避免电泳过程中凝胶运行设备不必要的过热。
为了长期保存,样品可以在液氮中快速冷冻。首先,你必须从杜瓦瓶中注入一些液氮到容器中,但不要满到瓶口。容器中充满过多的液氮是危险的,特别是当你从一个房间运送到另一个房间时。如果使用实验室电梯运输大量液氮,应设置标志,禁止其他人进入电梯。这是因为液氮可以降低空气中的氧气浓度,起到窒息剂的作用。当你快速冷冻样品时,不要用手套拿起它们,因为你的手指可能会被冻伤。相反,可以用塑料勺。
当从-80°C冰柜解冻样品时,有可能由于管内压力的突然变化,微移管的盖子会折断。请小心,并戴上护目镜,因为盖子可能会伤害你的眼睛。如果样品中含有放射性物质,就必须采取额外的预防措施。如果你不小心掉了这个样本,就会发生放射性泄漏,这是非常危险的。如果发生这种情况,你必须控制工作区域,并立即向辐射安全官员报告。
废物处理
在实验室里成功地工作了一整天之后,你必须清理你的工作台,处理掉你不需要的化学物质或微气管。破碎的玻璃器皿必须被丢弃在一个专门用于玻璃废料的指定垃圾箱里。生物废物,如琼脂板、组织培养板、细胞颗粒和用过的手套,必须丢弃到生物危害袋中。请确保您的垃圾箱内衬两层生物危害袋,以避免生物材料溢出。
含有有机化学品的溶液应放入指定的瓶子,并送交安全主任作进一步处置。手术刀和针头都是锋利的物品,它们必须被丢弃到生物危害罐中。记住要紧紧密封生物危害罐的盖子,以防止你的废物溢出。不要把尖锐的物品扔进有生物危害的袋子里,因为这些物品会刺穿柔软的材料,对拿袋子的人造成伤害。
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