差异由可逆与不可逆TRPA1激活亲电试剂表明胞质聚磷酸盐以外的辅助因子的参与

瞬时受体电位锚蛋白1 (TRPA1)是一种非选择性阳离子通道,表现在痛觉传入感觉神经的一个子集。当激活时,TRPA1可以引起疼痛的反应(如疼痛和防御性反射),以及周围神经末梢神经源性炎症。TRPA1的主机可以激活内源性(炎症介质)和外源性(污染物、食品)受体激动剂。许多TRPA1受体激动剂亲电子化合物共价修改TRPA1活性半胱氨酸残基,导致通道的激活。亲电试剂可以绑定通过可逆或不可逆反应根据化合物的结构。这里,膜片箝技术和钙成像已经被用来描述人类TRPA1 (hTRPA1)频道活动(在HEK293细胞中表达)的可逆与不可逆亲电试剂。钙成像显示,两个可逆的亲电试剂(如allylisothiocyanate [AITC])和不可逆转的亲电试剂(如碘乙酰胺[IA]和N-ethylmaleimide (NEM))快速诱导TRPA1激活。相比之下,膜片钳研究表明差异不可逆和可逆的亲电TRPA1激活。全细胞膜片钳研究表现出减少的动力学和级TRPA1激活NEM AITC相比。此外,单通道膜片钳实验显示减少开放概率NEM AITC相比和过氧化氢。 Both whole cell patch and excised patch clamp recordings were performed in the presence of 5mM polyphosphates. In preliminary gramicidin perforated patch recordings there was no difference in NEM and AITC-evoked TRPA1 activation. The data suggests that cytosolic factors other than polyphosphates are important for TRPA1 activation by irreversible electrophilic ligands.