单克隆和多克隆抗体

抗体是免疫蛋白发挥根本性作用的宿主防御传染性病原体如病毒、细菌和真菌。的免疫功能这些y形的蛋白质是由他们结合的能力抗原分子或公布的发现,在刺激免疫反应的细胞。

B这个表达他们的角色在宿主免疫力,抗体被证明是有价值的研究和治疗的目的了。两种类型的多克隆和单克隆抗体为科研人员提供不同的检测或量化目标抗原的方法很大程度上是由于不同的特异性和亲和力。在本文中,我们详细描述多克隆和单克隆抗体并考虑每种类型可用于各种应用程序。

多克隆抗体是什么?

一旦侦查宿主免疫细胞检测抗原,免疫系统经历了一连串的分子事件,引起生产刺激B细胞的多克隆抗体。多克隆抗体 ¹ 由不同的生化反应的抗体结合部位,antigen-binding网站扩展抗体的“武器”,使特定的绑定到不同的抗原结合位点在同一目标。

研究多克隆抗体是有吸引力的应用程序由于高亲和力结合的抗原的兴趣和他们的相对宽容的微小的变化表现出目标抗原的解决方案。例如,多克隆抗体通常显示诊断化验的敏感性高于单克隆同行由于其生物物理多样性对目标抗原。这些特性还可以有助于更有效地清除病原体 ² 单克隆抗体。然而,大规模使用多克隆抗体的可行性等因素限制我们无法工业繁殖这些蛋白质与一致性。

如何生成多克隆抗体的研究?

生成多克隆抗体适用于研究目的,实验动物必须先注射一种肽、蛋白质、分子或一个完整的细胞,刺激免疫反应。一旦宿主的免疫系统产生抗体注射抗原,他们必须收集和纯化,动物的抗血清。多克隆抗体纯化从动物血清的方法之一是通过应用antigen-coated磁珠免疫后降水或色谱方法。 ³ 后这个affinity-based净化方法减少非特异性抗体在最后多克隆人口,这些抗体可以用于检测方法如免疫印迹、免疫组织化学和酶联免疫吸附试验。

差异单克隆和多克隆抗体

单克隆抗体是什么?

与多克隆抗体,单克隆抗体 ⁴ 由高度识别一个特定蛋白质抗原表位。单克隆抗体生产体外杂种细胞,一种永生化细胞系像B细胞产生抗体的能力。

你如何产生单克隆抗体的研究?

杂种细胞的生产包括分离脾细胞的融合与永生化免疫小鼠骨髓瘤细胞。 克隆产生的杂种细胞筛选和选择是基于目标抗原特异性和反应。由于单克隆抗体共享高特异性单一抗原决定基,他们可以证明有用的研究科学家和临床医生。

单克隆和多克隆抗体,关键的差异

属性	单克隆抗体	多克隆抗体
人口的抗体	均匀	异构
结合特异性	识别一个目标抗原的表位	认识到多个目标抗原的抗原表位
灵敏度	更好的蛋白质定量	高产量低蛋白
大	由于高特异性较低	由于生物物理多样性高
生产成本	更昂贵的	便宜的
起源	单一刺激B细胞的谱系;杂种细胞	多个刺激B细胞谱系

使用的多克隆和单克隆抗体

的两个关键特性,定义多克隆和单克隆抗体的有效性涉及各自的抗原特异性和敏感性。抗体的特异性是由其绑定域和目标之间的相对亲和力抗原同时存在其他分子。开发这特异性免疫研究者和临床医生是至关重要的,因为许多应用程序专门利用多克隆和单克隆抗体检测目标分子。与抗原特异性抗体的敏感性是一个重要的参数,在实验室里决定了它的实用性。

高灵敏度的抗体非常适合诊断应用程序⁵免疫沉淀反应、侧流试验,免疫组织化学,免疫印迹和酶联免疫吸附试验(ELISA)由于他们的抗原识别能力低水平的目标。免疫沉淀反应是一种分析技术,从混合物中分离出抗原,利用抗原抗体结合。由此产生的抗原抗体复合物可以进一步处理固定化抗体或磁珠,使抗原抗体复合物分离混合物分析之前。

免疫沉淀反应,elisa⁶可以使用多克隆和单克隆抗体检测目标抗原的解决方案。间接免疫测定和夹心elisa是两种形式,使用这两种类型的抗体在整个过程:单克隆抗体通常应用的第一个(主)由于其高特异性靶抗原;多克隆抗体是更有用的辅助试剂由于他们能够放大信号与高灵敏度低。⁷除了elisa,用于检测抗体免疫组织化学技术和流式细胞术,因为他们可以检测antibody-antigen构造复杂的组织或细胞内高分辨率。

确认制造商允许的抗体特异性和敏感性分析elisa等不同形式取决于抗原和抗体,使这些测试非常多才多艺。例如,一个免疫测定,需要一个高度敏感的测试来检测未知病原体将受益于多克隆抗体由于多个抗原表位抗原识别能力。如果一个病原体或抗原曾为特征,那么它可能更适合在下游应用程序中使用单克隆抗体作进一步鉴定。

外部的实验室,抗体可以用来提高,模仿或恢复免疫系统疾病攻击目标的能力。除了一些例外,单克隆抗体是更适合治疗的目的,而不是多克隆抗体由于其同质性、高特异性单一抗原决定基及其低程度的大。⁸这些属性是特别重要的有效的癌症治疗,因为肿瘤细胞逃避或阻止免疫系统的能力。一些单克隆抗体治疗功能的方式来对付癌细胞,包括机制涉及到直接绑定诱导细胞死亡和间接机制,阻止肿瘤生长因子和血液供应。⁹

引用

1. Lipman NS,杰克逊LR、Trudel LJ Weis-Garcia f .单克隆和多克隆抗体:区别特征,应用程序和信息资源。ILAR杂志。2005年,46 (3):258 - 268。doi:10.1093 / ilar.46.3.258
2. Bregenholt年代,詹森,Lantto L Hyldig年代,Haurum JS。重组人类多克隆抗体:一种新的治疗病毒感染的抗体。咕咕叫。制药。Des。12 (16), 2007 - 2015 (2006)。doi:10.2174 / 138161206777442173
3. Grodzki AC, Berenstein e抗体纯化:硫酸铵分馏或凝胶过滤。C:奥利弗,Jamur MC, eds。采用免疫方法和协议。分子生物学方法。胡玛纳出版社;2010:15-26。doi:10.1007 / 978 - 1 - 59745 - 324 - 0 - _3
4. 纳尔逊PN,雷诺兹通用、Waldron EE病房E, Giannopoulos K,穆雷PG,单克隆抗体。摩尔分册。53 2000;(3):111 - 117。doi:10.1136 / mp.53.3.111
5. 阿斯科利,Aggeler b被忽视的好处使用多克隆抗体。生物学技术。2018,65 (3):127 - 136. - doi:10.2144 / btn - 2018 - 0065
6. 霍恩贝克,酶联免疫吸附试验。咕咕叫Protoc Immunol。1992;1:2.1.1-2.1.22。doi:10.1002/0471142735. im0201s01
7. Alhajj M, Farhana酶联免疫吸附测定。(2021年2月6日更新)。:StatPearls[网络]。金银岛(FL): StatPearls出版;2021年1月。可以从:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK555922/
8. 谢泼德HM,菲利普斯GL, D Thanos C, Feldmann m与单克隆抗体疗法的发展和相关的蛋白质。地中海(Lond)。2017;17 (3):220 - 232. - doi:10.7861 / clinmedicine.17 - 3 - 220
9. 维纳哈维D, l .单克隆抗体在癌症治疗。抗体(巴塞尔)。2020;9 (3):34。doi:10.3390 / antib9030034