MIQE RT qPCR实验指南

科学家和期刊采用的最小信息很慢的出版定量实时PCR实验(MIQE)成立于2009年的应用指南,提高可靠性的实时PCR (qPCR)和逆转录qPCR (RT-qPCR)数据。帮助提高收养,Bio-Rad科学家发表一个简短的和实用的指导,简明地总结了生产高质量所需的关键步骤,可再生的实验室进行RT-qPCR实验数据。

我们采访的合著者指南,Bio-Rad现场应用专家,肖恩·泰勒,了解更多MIQE的重要性,低采用率和未来的可能。

阿瑟:MIQE为何如此重要?

肖恩·泰勒(ST): MIQE提供了一个框架,规范所有实验室执行qPCR实验的方式。这样可以确保高质量和可再生的数据之间的内部和实验室。指南之前,研究人员进行qPCR实验主要基于教义从资深科学家或学生从以前的实验室没有任何这些教义的关键考试。这导致了广泛变化的技术和方法在每一步qPCR实验。这些步骤包括实验设计;样品处理和提取;RNA分离、净化和资格;反转录;,qPCR反应使用验证引物和参考基因。在任何这些步骤可以犯的错误并导致artifactual结果和文章的论文。自从科学界依赖于出版过的,同行评鉴过的文献设计未来的项目,研究可以大大受损,如果文件用于指导实际上是误导。 Adhering to MIQE is important for ensuring that data published with qPCR permits the steady progress of research in the many fields that use this technique.

阿瑟:为何采用如此低的利率?

圣:MIQE没有更广泛采用内由于信仰的许多实验室已经使用该技术几年来,他们已经正确地进行实验。在实践中,科学的设计是基于实验和严格遵守协议的研究从一代一代传下去。因此,改变我们的方式执行一个特定的实验进行了多年来以同样的方式就像改变一种生活方式或移居国外。即使有很好的理由去改变,总有担心结果数据可能不同,可能不再支持先前工作的结论。

阿瑟:你的论文怎么鼓励研究人员采用MIQE ?

圣:本文简明地对比两个好的和糟糕的实践qPCR实验的每一步。科学家将能够轻松地与例子中提到的两个“的”和“须知”qPCR表,我们希望将被用作一个快速参考qPCR实验设计和一致性MIQE指南。我们也希望本文的简洁和实用性将鼓励科学界阅读和采用高质量描述的步骤,可再生的数据。

阿瑟:出版物没有MIQE目前收到了吗?有怀疑的可靠性数据?

圣:这完全取决于杂志和评论者。越来越多的期刊MIQE背后站,确认的数据发表qPCR是困难的或不可能重现。这些期刊因此需要提交补充数据显示一致性的实验JMMB文章中列出的关键标准。

然而,这仍然是一个大比例的科学界和期刊忽视MIQE主要原因前所述,因此仍有许多工作要做推动科学界的方向指南。

我们仍然非常乐观,认为MIQE将继续采用和生成将继续成长意识。Bio-Rad之内,我们的现场应用科学家教育所有实验室使用qPCR仪器和试剂技术的好处MIQE和许多实验室已经改变了他们的实践随大流。我们发现有怀疑关于qPCR公布数据的可靠性尤其是在实验室经历了培训和至少部分中描述的“可怜”实践JMMB条由许多实验室共享使他们问“为什么没有人教给我吗?”的回答是“因为你教不教的人。”

阿瑟:你设想的时候MIQE会要求出版吗?

圣:我们当然希望是这样,我怀疑这个观点与成千上万的科学家共同阅读和引用MIQE在他们的论文。科学家们只有货币是他们发表的文章,翻译拨款维持循环的研究。整个过程分解,如果公布的数据不能反映生物学测试,导致误导性结论混淆,降低发动机的研究。科学家希望生产高质量数据,经得起时间的考验的同龄人可以构建文学。我们相信,通过继续为MIQE生成意识研究团体将拥抱指南来帮助所有的人。

肖恩·泰勒在视频中提供了更多信息后MIQE RT qPCR实验指南

肖恩·泰勒说阿什利,总编辑技术网络。188金宝搏备用你可以找到阿什利Google +并遵循技术网络188金宝搏备用推特。