描述
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EveryBlot阻断缓冲区提供5分钟的阻塞和所有西方的最大灵敏度的屁股不管检测方法。
特性和好处
- 减少非特异性抗体绑定来降低背景,同时保持良好的灵敏度
- 化学发光和荧光检测
- 不含磷酸盐缓冲。适合使用phospho-specific抗体
- 完整的阻塞5分钟
推荐的协议
对于小规模的屁股,使用至少10毫升阻塞和抗体孵化的步骤。
对于midi-sized墨迹图,使用至少20毫升。
- 块添加到膜和孵化与搅拌5分钟
- 稀释中小抗体在较之于块和孵化与搅拌1小时
对PVDF荧光检测,添加SDS在二级抗体溶液的0.02%。
荧光检测
在HEK293细胞荧光多路检测。蛋白质电泳后,被转移到低荧光PVDF。离开,污点封锁在一个荧光优化拦截器1小时。污点阻塞在EveryBlot阻断缓冲区5分钟。阻塞后,墨迹相同处理和成像信号,最大限度地减少为每个通道独立的背景。
化学发光检测
化学发光检测HEK 293个细胞的三个目标。阻塞后,墨迹相同处理和成像和显示使用相同的参数。
磷蛋白质检测
没有干扰磷蛋白质检测。检测总(绿色)和phospho-specific(红色)的目标。如果离开,Jurkat细胞(-)或(+)刺激calyculin a中心,A431细胞如果(-)或与EGF刺激(+)。
低背景在整个频谱
阻断剂对膜的影响背景。低荧光PVDF膜没有样品或抗体荧光优化阻断缓冲区或阻塞EveryBlot阻断缓冲区。洗涤后,膜被成像并排ChemiDoc像素的成像系统。在每一个荧光通道膜自体荧光测定。其他供应商的缓冲区();EveryBlot缓冲区()。
包装选项
产品 | 产品目录号 |
---|---|
EveryBlot阻断缓冲区,50毫升 | 12010947 |
EveryBlot阻断缓冲区,500毫升 | 12010020 |
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