在Exelixis)微量热法在药物发现中的应用

了解药物靶蛋白相互作用的分子细节的一个关键组成部分的药物发现过程在现代制药工业。我们已经实施一组全面的高度集成的生物化学和生物物理的方法更好地描述目标蛋白质及其相互作用抑制剂。这些技术使我们能够识别化学不稳定(氧化、脱氨基作用等)、蛋白水解或化学退化,翻译修饰,和物理不稳定表面变性等可溶性聚合和降水。更完整的常规描述感兴趣的蛋白质告诉的发展更好的配方,我们能够量化制定组件蛋白质稳定性的影响。的一个关键组成部分的生物物理阿森纳是调查的能力由ITC和DSC蛋白质的热力学性质。这两种技术是建立在完善的基本原则。ITC提供热力学数据用来证实绑定模型,定量的绑定焓(ΔH),熵(TΔS),自由能缔合常数Ka(ΔG)和绑定。DSC测量热量变化与靶蛋白的热变性,已广泛应用于了解蛋白质折叠和展开。赋予的程度的稳定化合物绑定通常是相关的关联互动。展开相关的热力学(改变Tm,ΔCp,ΔH)揭示复合绑定的属性信息。Classically, both measurements required a significant amount of protein and commitment of significant operator time, as the instrumentation required manual operation. These factors limited wide application of these measurements. Recently, MicroCal LLC. introduced two new instruments, the AutoITC and AutoDSC, with significantly improved sensitivity, greatly reduced sample consumption, robotic automation and user friendly software packages that greatly simplify experimental set-up and data analysis. In this paper, we will present examples of disciplines in small molecule drug discovery where this new instrumentation has allowed us to improve the efficiency of our processes.