案例研究:Kaelberer博士使用Milo验证神经上皮回路
精神食粮
Melanie Maya Kaelberer博士是杜克大学的博士后,她的研究已经为一个迅速出现的感兴趣的领域做出了重大贡献:肠道-大脑信号。凯尔贝雷尔博士是杜克大学一个研究小组的成员,该小组正在研究突触链如何将食物转化为思维。他们采用Milo™来帮助揭示肠道表面的第一个突触——它第一次与大脑相遇的地方。
肠道如何与大脑对话?
事实证明,一种新发现的肠道感觉细胞群,他们称之为“神经荚细胞”,为肠道如何与颅神经快速通信这个问题提供了之前未知的答案。凯尔贝雷尔博士和同事们通过技术和工具的结合,揭示了神经荚细胞在突触上将信息传递给神经元、使大脑能够感知肠道刺激方面的作用。
由于需要一种蛋白质组学、单细胞方法来验证他们用其他方法获得的高分辨率、突触前和转录组信息,该团队转向了Milo上的单细胞西部片,并表明肠内分泌细胞的一个子集含有突触前粘附蛋白,包括一些突触粘附所必需的蛋白质。“我们使用Milo来确定有多少肠道感觉细胞是神经足细胞,因此包含突触前蛋白Synapsin-1,使它们能够将刺激传导到神经元上,”Kaelberer博士澄清说。
米洛和验证的重要性
单细胞RNA研究允许研究人员在单个实验中分析单个细胞中的RNA表达异质性,但细胞蛋白质水平并不总是与mRNA浓度成正比。这使得在蛋白质水平上验证单细胞RNA表达数据特别重要,以确保对细胞功能做出准确和完整的结论。米洛为杜克大学的研究人员提供了单细胞分辨率的Western blotting技术。
凯尔贝勒博士说,通过使用神经足细胞样本,“米洛让我们能够在单细胞水平上量化蛋白质的数量,并表明神经足细胞具有形成突触的机制。”她继续说道:“在研究中,使用不同的方法来展示结果是很重要的。我们有单细胞RNA和免疫组化数据,我们用米洛来证实我们的结果。”凯尔贝雷尔博士及其同事利用Milo补充了他们的研究成果,最近在《科学》杂志(Science)上发表了一篇备受瞩目的文章。
当被问及是否还有其他想要补充的东西时,Kaelberer博士借此机会强调了Milo配套的Scout™软件的可用性,“分析软件使数据分析非常简单。”事实上,Scout软件可以自动进行定量数据分析。整个单细胞西方工作流程是灵活的,可以为您的蛋白质目标和感兴趣的样品量身定制。
参考:一种用于营养感觉转导的肠-脑神经回路,MM Kaelberer, KL Buchanan, ME Klein, BB Barth, MM Montoya, X Shen, DV Bohórquez,科学,2018;361: 6408。