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开发用于COVID-19诊断的抗体和抗原

信贷:Pixabay

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在SARS-CoV-2基因组公布一个月后,本土抗原公司成为第一批宣布商业投放病毒S1和S2抗原的公认供应商之一。此外,该公司正在继续努力开发一系列其他冠状病毒抗原和抗体。

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最近,我们采访了The Native Antigen Company商业总监Andy Lane博士,了解了这些蛋白质是如何产生的,刺突蛋白在介导SARS-CoV-2进入细胞中发挥的作用,以及如何利用它们推动COVID-19诊断技术的发展。

安娜·麦克唐纳(AM):像COVID-19这样的病毒感染可以通过哪些方式得到诊断?

安迪·莱恩(AL):
诊断病毒感染的两种主要方法是聚合酶链反应(PCR)和免疫测定(抗体和抗原试剂盒)。

PCR检测方法快速、易于设计,是COVID-19诊断的基础。然而,由于PCR依赖于从呼吸道中扩增病毒RNA样本,它仅限于在病毒仍然存在的急性感染阶段使用。由于需要扩增来检测RNA, PCR检测也很难小型化以用于护理点(PoC)。

像RNA一样,抗原也存在于感染者的呼吸道中,可用于诊断急性期感染。然而,抗原检测相对于PCR的额外优势是,抗原可以用廉价、简单的PoC格式检测,例如不依赖于样品扩增的横向流动检测(LFA)。


LFAs的基本设计,类似于家庭怀孕测试。lfa通常包括一个塑料盒,其中包含一条能够吸收和运输血液或痰中沉积的分析物的纸。抗原迁移并结合并测试抗体以确认感染,用一条可见的实线表示。二级控制线确保测试正常工作。

由于其简单的设计,lfa可以大规模生产并广泛用于社区或上门检测,提供快速结果,以确定个人是否应该自我隔离和/或寻求医疗护理。这可能会改变COVID-19的游戏规则,因为可以对更大比例的人口进行检测,而不需要个人前往已经不堪重负的医疗机构。

与抗原和RNA相反,针对SARS-CoV-2产生的抗体呈现较慢(IgM通常为9-10天)(雷, 2020;, 2020),但可能会在血液中存留多年。因此,虽然抗体可能不是急性感染的良好标记,但它们是检测历史感染的理想指标。

抗体检测在确定COVID-19的真实传播和病死率方面可能具有宝贵价值,使公共卫生机构能够更好地模拟其传播并指导医疗政策。抗体检测还可用于诊断接触过病毒的医护人员,以确保他们在返回工作岗位前已形成自然免疫力,并测量患者的免疫反应,以支持快速开发急需的COVID-19疫苗。

AM:试剂在这个过程中处于什么位置?

艾尔:
任何有效的免疫分析的基础都是用于设计它的关键试剂,即抗原和抗体。这些蛋白质驱动血清学测试的基本反应,并最终决定其敏感性和特异性。

由于处理活病毒的生物安全问题,许多实验室必须使用重组系统表达的抗原。然而,并不是所有的蛋白质表达系统都是相同的,这可能导致重组抗原与其原生抗原之间存在显著差异。例如,更简单的系统大肠杆菌缺乏必要的糖基化机制来产生具有人类细胞所有翻译后修饰的蛋白质,这可以改变表位和蛋白质构象。因此,在设计诊断分析时,这可能导致较差的敏感性和特异性。

天然抗原公司使用一种专有的哺乳动物美德表达系统生产具有完全糖基化和适当折叠的重组蛋白,这两者都是充分的生物和抗原活性所必需的。通过使用与自然界中发现的抗原非常相似的抗原,检测开发人员就能够设计出具有高灵敏度和特异性的试剂盒。

问:什么是世卫组织研发蓝图?天然抗原公司的工作如何支持这一点?

艾尔:
2015年,在194个成员国的要求下,世界卫生组织召集了广泛的专家联盟,共同制定了全球卫生战略重点新发传染病研发蓝图《蓝图》列出了一份不断发展的疾病清单,这些疾病构成严重的公共卫生风险,有流行的可能,但目前没有充分或没有预防和治疗办法。该蓝图在指导我们支持正在进行的预防和诊断新发疾病的研究方面具有至关重要的作用。

其中一种疾病是“X病”,这是一种尚未为人所知的病原体,有大流行的潜力,或者换句话说,它是下一个“大事件”。最近几个月,COVID-19显然是一种新的“X疾病”,已被列入蓝图清单。

根据蓝图中概述的指导,本地抗原公司开发了一系列全面的冠状病毒抗原和抗体支持在体外诊断和药物研究人员帮助推动血清学分析和疫苗的发展,这对遏制这种疾病的传播至关重要。

AM:本土抗原公司在新冠病毒基因组发布仅一个月后就发布了新冠病毒抗原。如何使用这些抗原来帮助阻止COVID-19的传播?

艾尔:
今年2月,The Native Antigen Company成为世界上首批发布商用SARS-CoV-2 S1和S2抗原的公认供应商之一。这些抗原的生产是为了支持迫切需要的SARS-CoV-2对抗措施的开发,目前正被世界领先的组织用于开发COVID-19的诊断试剂和疫苗。我们的科学家仍在实验室努力工作,开发新的抗原和抗体来支持冠状病毒研究。如欲了解我们最新的产品发展,请参阅我们的冠状病毒管道

AM:冠状病毒刺突蛋白的作用是什么?为什么产生这种蛋白质的抗原如此重要?

艾尔:
刺突蛋白是SARS-CoV-2表面可见的突出物,使病毒具有冠状外观的特征。这些同型三聚体蛋白高度糖基化,每个蛋白由两个不同的亚基组成:S1和S2。


新型冠状病毒的透射电镜图。这张图片是澳大利亚动物卫生实验室(AAHL)的工作,CSIRO。

Spike的作用是作为一个分子钥匙,它通过S1受体结合域识别并结合到我们细胞表面的特定ACE2细胞表面受体(锁)来实现。当S1与ACE2结合时,Spike会发生巨大的结构变化,改变ACE2的构象,并介导病毒进入细胞。

然而,由于Spike蛋白必须投射到外部环境中才能有效地结合细胞表面受体,因此它们暴露在免疫系统的识别之下。这使得Spike成为免疫显性的冠状病毒抗原,使其引发强烈的中和抗体反应(居 , 2020)这使它成为诊断和疫苗开发的重点目标。

安迪·莱恩博士接受了科技网络科学作家安娜·麦克唐纳的采访。188金宝搏备用

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安娜·麦克唐纳
安娜·麦克唐纳
科学作家
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