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液体活检测试:协议和步骤

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在这篇文章中,探索一些先进的分子技术的最主要用于检测生物标志物参与液体活检。

液体活检是如何工作的呢?

一个液体活检由tumor-derived材料的隔离和表征,如完整的癌细胞或核酸——从癌症病人的体液样本收集获取疾病信息。1

因为大多数肿瘤都是接触到血液中,液体活检通常涉及血液样本分析,但其他体液来源包括尿液、粪便、唾液、胸膜液体,脑脊髓液和腹水或泥沙。2

液体活检目标

潜在的列表tumor-derived在液体活检可以分析材料,包括:

  • 循环肿瘤细胞(ctc)3- - - - - -完整的小学和转移性肿瘤的癌细胞脱落。
  • 循环DNA(游离cfDNA)4循环肿瘤DNA (ctDNA)4片段的DNA释放细胞(cfDNA)和tumor-derived DNA分数(ctDNA)。
  • 细胞外囊泡(EVs)5——小成的囊泡,包括micro-vesicles和液,它可以携带货物,如核酸和蛋白质,在肿瘤的转移。
  • 循环脱细胞RNA (cfRNA)6——癌症相关的信使rna或非编码rna,包括小分子核糖核酸(microrna)。
tumor-derived材料的列表,液体活检可以检测。
tumor-derived材料,液体活检可以检测。信贷:技术网络188金宝搏备用

液体活检协议和步骤

液体活检协议的重点是临床相关信息的快速检测具有灵敏度高,选择性和特异性,而微创。


技术选择液体活检将取决于目标的性质。例如,它可能涉及隔离、枚举和表征的ctc——或者其他tumor-derived材料的隔离和分子分析。

ctc

1。 隔离

在过去的十年里,已经出现了几种技术,旨在大池的分离和独立的ctc循环血细胞,然后计数和描述它们3每个这些方法利用一个关键的区别,歧视ctc从正常血细胞(如微分基因/蛋白表达、形态、体积或生物物理属性)来启用这些非常罕见的敏感的选择和捕获细胞。它们包括:


免疫检测方法——这是最广泛使用的方法和使用选择性地结合细胞表面抗原的抗体,歧视ctc的血细胞。这些抗体可以结合磁性纳米颗粒7微流控芯片的或固定在墙上8隔离ctc。新一代的CTC antigen-based双重形态与微流体平台结合immunomagnetic珠子。

  • 尺度依赖的隔离技术——包括过滤、微流体、离心和惯性聚焦。
  • 直接成像——成像检测方法使用特定的荧光标记来识别和计数ctc的血液。这些技术的独特之处在于它的样品制备、检测算法和荧光团。
  • 双向电泳9- - - - - -这依赖于粒子具有不同偏振不同非均匀电场下移动。

2。 枚举

用于计数的方法的数量ctc样品中检测出包括阻抗10,高通量成像11、流式细胞仪12和人工智能。

3所示。 描述

技术用于描述ctc包括免疫染色、荧光原位杂交(鱼),排序,定量逆转录聚合酶链反应(存在),表达分析和细胞培养。3

电动汽车

EVs被液体活检的临床应用迄今为止缺乏有限的简单、高效的程序获得EVs纯度高。13的一些主要策略用于分离这些细胞外囊泡包括超速离心法、聚合物沉淀、超滤、凝胶排阻层析法、亲和隔离和显微射流技术技术。13每一种方法都有其优点和缺点。

cfDNA / ctDNA

几种方法被用来量化和检测肿瘤突变cfDNA / ctDNA14——包括数字PCR滴15、珠子乳液、放大和磁学(传送)16下一代sequencing-based方法17(全外显子组或全基因组测序),癌症个性化分析的深度测序(CAPP-seq)16和tagged-amplicon深度测序(TAm-Seq)。18ctDNA表观遗传特征的剖析,如甲基化签名19,可以提供原产地的信息组织。

cfRNA

分析循环(cfRNA)游离提供了独特的机会来检测癌症,预测肿瘤的起源,并确定分子亚型。20.但技术和生物多样性,加上缺乏标准化的协议,目前阻碍RNA-based液体活检的临床开发。21

引用

  1. 孤独的SN,这个年代,Masoodi T, et al。液体活检:一步变换诊断、预后和治疗癌症的未来。摩尔。癌症。2022;21 (1):79。doi:10.1186 / s12943 - 022 - 01543 - 7
  2. Satyal U,斯利瓦斯塔瓦和Abbosh p .尿液Biopsy-Liquid黄金膀胱癌的分子检测和监测。肿瘤防治杂志。2019;19 (9):1266。doi:10.3389 / fonc.2019.01266
  3. Habli Z, AlChamaa W,萨博R, Kadara H, Khraiche毫升。循环肿瘤细胞检测技术和临床实用程序:挑战和机遇。癌症(巴塞尔)。2020;12 (7):1930。doi:10.3390 / cancers12071930
  4. 燕Y,郭问,王F, et al .游离DNA:希望在癌症和潜在应用。前细胞Dev杂志。2021;9:639233。doi:10.3389 / fcell.2021.639233
  5. 乔F,潘P,燕J, et al。肿瘤-派生细胞外囊泡在癌症中的作用及其临床应用进展(审查)。Int J杂志。2019年,54 (5):1525 - 1533。doi:10.3892 / ijo.2019.4745
  6. Roskams-Hieter B, Kim HJ Anur P, et al .等离子体RNA分析区分癌症与游离3条件在固体和血液恶性肿瘤。npj大致Onc。2022;6 (1):1 - 11。doi:10.1038 / s41698 - 022 - 00270 - y
  7. 苏D,吴K,萨哈R,刘J,王JP。磁性纳米技术与液体活检对早期癌症诊断:复习一下。J癌症转移治疗。2020;19。doi:10.20517 / 2394 - 4722.2020.48
  8. 崔邹D, D .先进的隔离和基于微流体的循环肿瘤细胞的检测。癌症生物医学杂志。2018年15 (4):335 - 353。doi:10.20892 / j.issn.2095-3941.2018.0256
  9. Russo GI,马苏之后N, Romano, et al .双向电泳的作用对于癌症诊断和预后。癌症(巴塞尔)。2021;14 (1):198。doi:10.3390 / cancers14010198
  10. 任Ghassemi P, X,福斯特BM,克尔英航,充分的m . Post-enrichment循环肿瘤细胞检测和枚举通过可变形性阻抗血细胞计数。Biosens。Bioelectron。2020;150:111868。doi:10.1016 / j.bios.2019.111868
  11. Keomanee-Dizon K, Shishido库恩S和p .循环肿瘤细胞:高通量ctc的成像和生物信息学分析。最近的结果癌症Res。2020;215:89 - 104。doi:10.1007 / 978 - 3 - 030 - 26439 - 0 - _5
  12. Lopresti, Malergue F, F Bertucci, et al .敏感和容易筛查循环肿瘤细胞流式细胞术。江森自控的洞察力。4 (14):e128180。doi:10.1172 / jci.insight.128180
  13. 刘J,陈Y,裴F, et al .细胞外囊泡在液体活检:潜在的疾病诊断。生物医学研究的国际。2021;2021:e6611244。doi:10.1155 / 2021/6611244
  14. Nikanjam M,加藤,Kurzrock r .液体活检:当前技术和临床应用。血液学和肿瘤学杂志》上。2022;15 (1):131。doi:10.1186 / s13045 - 022 - 01351 - y
  15. 金子,Kanemaru H, Kajihara我,et al。液体biopsy-based分析ddPCR CAPP-Seq黑色素瘤患者。北京医学科学。2021,102 (3):158 - 166。doi:10.1016 / j.jdermsci.2021.04.006
  16. Garcia-Foncillas J,阿尔巴E,阿兰达E,等。将喜气洋洋的技术作为液体活检纳入结直肠癌患者的临床实践管理:一个专家小组审查。安杂志。2017;28 (12):2943 - 2949。doi:10.1093 / annonc / mdx501
  17. 林C,刘X,郑B,曾Ke R CM。通过挥动液体活检,ctDNA诊断。生活(巴塞尔)。2021;11 (9):890。doi:10.3390 / life11090890
  18. 霍沃斯盖尔D,劳森ARJ, K,高度敏感的液体活检等。发展平台检测临床相关的癌症突变等位基因分数较低的无细胞DNA。《公共科学图书馆•综合》。2018;13 (3):e0194630。doi:10.1371 / journal.pone.0194630
  19. 刘李P, S, Du L,穆赫辛尼经常G,王张Y, c .液体活检基于DNA甲基化的生物标志物检测和肺癌的预后。中国。表观遗传学。2022;14 (1):118。doi:10.1186 / s13148 - 022 - 01337 - 0
  20. 拉尔森MH,潘W, Kim HJ et al .脱细胞转录组的综合特征揭示了组织和subtype-specific癌症生物标记物的检测。Nat Commun。2021;12 (1):2357。doi:10.1038 / s41467 - 021 - 22444 - 1
  21. Cabus L,拉加德J, Curado J, Lizano E, Perez-Boza J .当前的挑战和最佳实践长期游离RNA生物标志物的发现。生物标志物的研究。2022;10 (1):62。doi:10.1186 / s40364 - 022 - 00409 - w
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