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单克隆抗体vs多克隆抗体


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抗体是免疫蛋白它们在宿主抵御病毒、细菌和真菌等感染因子方面发挥着重要作用。的免疫功能这些y型蛋白质是由它们的结合能力决定的抗原这些分子是由细胞释放或在细胞上发现的,可以刺激免疫反应。

B
除了它们在宿主免疫中的作用外,抗体还被证明是有价值的研究而且治疗的目的了。两种类型的抗体-多克隆抗体和单克隆抗体-为研究科学家提供了不同的方法来检测或量化目标抗原主要是由于特异性和亲和性的差异。在这篇文章中,我们更详细地描述了多克隆抗体和单克隆抗体,并考虑每种类型如何用于各种应用。

什么是多克隆抗体?


一旦监测免疫细胞在宿主中检测到抗原,免疫系统就会经历一连串的分子事件,诱导受刺激的B细胞产生多克隆抗体。多克隆抗体
1 由生化上不同的对位结构组成,即抗体延伸“臂”上的抗原结合位点,能够与同一目标抗原上的不同结合位点特异结合。

多克隆抗体由于其对目标抗原的高亲和力和对目标抗原在溶液中表现出的微小变化的相对耐受性的结合,在研究应用中具有吸引力。例如,由于多克隆抗体对目标抗原的生物物理多样性,在诊断分析中通常比单克隆抗体表现出更高的敏感性。这些特征也有助于更有效地清除病原体
2 而不是单克隆抗体。然而,大规模使用多克隆抗体的可行性受到一些因素的限制,例如我们无法在工业上一致性地复制这些蛋白质。

如何产生用于研究的多克隆抗体?


为了产生适合研究目的的多克隆抗体,必须首先向实验动物注射一种肽、蛋白质、分子或整个细胞,以刺激免疫反应。一旦宿主免疫系统产生针对注射抗原的抗体,就必须从动物的抗血清中提取并纯化这些抗体。免疫后应用抗原包被磁珠、沉淀或层析法从动物血清中纯化多克隆抗体的方法之一。
3. 在这种基于亲和的纯化方法减少了最终多克隆群体中的非特异性抗体后,这些抗体可以用于基于检测的方法,如western blotting,免疫组织化学和酶联免疫吸附测定。

单克隆抗体和多克隆抗体的区别

单克隆抗体和多克隆抗体的区别

什么是单克隆抗体?


与多克隆抗体不同,单克隆抗体
4 由高度特异性的蛋白质组成,可以识别抗原上的单个表位。产生单克隆抗体体外杂交瘤是一种永生细胞系,具有像B细胞一样产生抗体的能力。

如何产生用于研究的单克隆抗体?


杂交瘤的产生涉及免疫小鼠分离的脾细胞与永生化骨髓瘤细胞的融合。
由此产生的杂交瘤的克隆,然后筛选和选择基于靶抗原特异性和反应性。由于单克隆抗体对单个表位具有高度特异性,它们对研究科学家和临床医生都很有用。

单克隆抗体与多克隆抗体-关键区别

属性

单克隆抗体

多克隆抗体

抗体的数量

均匀

异构

结合特异性

识别目标抗原上的单个表位

识别目标抗原上的多个表位

灵敏度

更好的蛋白质定量

低量蛋白质含量高

低是因为高特异性

更高是因为生物物理多样性

生产成本

更昂贵的

便宜的

起源

单个受刺激B细胞谱系;杂种细胞

受刺激B细胞的多种谱系

多克隆抗体和单克隆抗体的用途


定义多克隆抗体和单克隆抗体有用性的两个关键特征涉及它们各自对抗原的特异性和敏感性。抗体的特异性是由其他分子存在时其结合域与目标抗原之间的相对亲和力决定的。这种特异性的开发对于免疫学研究人员和临床医生来说是至关重要的,因为许多应用都是利用多克隆抗体和/或单克隆抗体来特异性地检测目标分子。与抗原特异性相结合,抗体的敏感性是决定其在实验室中有用性的一个重要参数。

高敏感性抗体非常适合于诊断应用
5比如免疫沉淀,横向流动试验,免疫组织化学,免疫印迹而且酶联免疫吸附试验(ELISA)因为它们能够识别低水平的目标抗原。免疫沉淀是一种分析技术,通过使用特异性结合抗原的抗体将抗原从混合物中分离出来。所得到的抗原抗体复合物可以通过固定化抗体或磁珠进一步处理,这允许抗原抗体复合物在分析之前从混合物中分离出来。

如免疫沉淀,elisa
6可以使用多克隆抗体或单克隆抗体检测溶液中的目标抗原。间接elisa和夹心elisa是两种免疫分析形式,在整个过程中使用这两种类型的抗体:单克隆抗体通常首先应用(主要),因为它们对目标抗原的高度特异性;由于多克隆抗体能够以高灵敏度放大低信号,因此更适合作为二级试剂。7除了elisa之外,抗体还适用于免疫组织化学和流式细胞术等检测技术,因为它们可以高分辨率检测复杂组织或细胞内的抗体-抗原结构。

制造商对抗体特异性和敏感性的确认,使得elisa等免疫分析方法可以根据抗原和抗体的使用方式采取不同的形式,这使得这些测试非常通用。例如,需要高灵敏度测试来检测未知病原体的免疫分析将受益于多克隆抗体,因为它们能够识别抗原上的多个表位。如果病原体或抗原之前已经被鉴定过,那么在下游应用中使用单克隆抗体进行进一步鉴定可能更合适。

在实验室之外,抗体可以用来增强、模拟或恢复免疫系统攻击疾病目标的能力。除了一些例外,由于单克隆抗体的同质性、对单一表位的高特异性和低交叉反应度,它们比多克隆抗体更适合于治疗目的。
8这些特性对于有效的癌症治疗尤其重要,因为肿瘤细胞能够逃避或阻断免疫系统。单克隆抗体疗法对癌细胞起作用的一些方式包括直接结合诱导细胞死亡的机制,以及阻断肿瘤生长因子和血液供应的间接机制。9

参考文献

  1. Lipman NS, Jackson LR, Trudel LJ, weiss - garcia F.单克隆抗体与多克隆抗体:区分特征,应用和信息资源。ILAR杂志.2005年,46(3):258 - 268。doi:10.1093 / ilar.46.3.258
  2. 张志刚,张志刚,张志刚,张志刚,张志刚。重组人多克隆抗体:一类新的抗病毒感染治疗性抗体。咕咕叫。制药。Des. 12(16), 2007-2015(2006)。doi:10.2174 / 138161206777442173
  3. Grodzki AC, Berenstein E.抗体纯化:硫酸铵分馏或凝胶过滤。在:奥利弗C,贾穆尔MC,编辑。免疫细胞化学方法和方案.分子生物学方法。胡玛纳出版社;2010:15-26。doi:10.1007 / 978 - 1 - 59745 - 324 - 0 - _3
  4. Nelson PN, Reynolds GM, Waldron EE, Ward E, Giannopoulos K, Murray PG.单克隆抗体。摩尔分册.53 2000;(3): 111 - 117。doi:10.1136 / mp.53.3.111
  5. Ascoli CA, Aggeler B.忽视了使用多克隆抗体的好处。生物学技术.2018, 65 (3): 127 - 136. - doi:10.2144 / btn - 2018 - 0065
  6. 酶联免疫吸附测定。Curr Protoc Immunol。1992; 1: 2.1.1-2.1.22。doi:10.1002/0471142735. im0201s01
  7. Alhajj M, Farhana A.酶联免疫吸附试验。[2021年2月6日更新]。在:StatPearls[互联网]。《金银岛》(FL): StatPearls Publishing;2021年1月。可以从:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK555922/
  8. 谢泼德HM,菲利普斯GL, D灭霸C,费尔德曼M.单克隆抗体及相关蛋白治疗的进展。临床医学(伦敦)。2017; 17 (3): 220 - 232. - doi:10.7861 / clinmedicine.17 - 3 - 220
  9. 张文杰,张文杰,张文杰,等。单克隆抗体在肿瘤治疗中的应用。抗体(巴塞尔).2020; 9(3): 34。doi:10.3390 / antib9030034

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