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无的价值——发展地方病诊断的挑战

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如果你不知道问题在哪里,你怎么治疗呢?这是医护人员和兽医面临的第一个挑战,而诊断测试是解决这个问题的关键。就传染病而言,诊断在疾病预防方面也发挥着巨大作用,能够发现受感染的个人,以便采取措施限制进一步传播和遏制潜在病例。然而,控制和治疗效果只能与诊断测试一样好,这就是为什么开发可靠、可靠和敏感的测试非常重要。但当你想检测的疾病是地方病时,它可能会带来一些额外的挑战。

开发诊断测试


在设计传染病诊断测试时,有一些重要的考虑因素需要牢记,包括:

  • 您是想直接检测感染因子(例如,通过培养或PCR/定量PCR)还是想间接检测感染(例如,宿主抗体的夹心ELISA或宿主体内生物标志物的水平)?

  • 在感染期间的什么时候可以检测到标记物(直接或间接),在阳性个体变得明显之前是否存在滞后(如抗体反应的形成)?

  • 检测所需目标(血液、尿液、鼻拭子等)的最佳测试介质是什么?

  • 最合适的检测形式是什么(即护理点检测或实验室检测)?是否存在要求结果的限制性时间压力(对于某些疾病,每分钟都很重要)?

  • 你如何确定什么是正的,什么是负的(也就是说,你是否需要一个临界值)?

  • 要多少钱?开发和零售成本必须与目标市场愿意支付的成本相平衡。


负控制的重要性和问题


然而,无论你选择哪一种方法,仅仅说“看!所有这些真正呈阳性的样本在我的检测中都呈阳性。”同样重要的是,要知道真正呈阴性的样本也会被检测为阴性,否则检测几乎没有价值。作为开发过程的一部分,在已知的阳性和阴性样本面板上运行分析是很重要的,这些样本的范围从阴性到弱阳性再到强阳性,以查看您的测试有多好。从这些数据中敏感性和特异性你的测试结果就可以计算出来了。但要让这一切成为可能,你需要一个负样本库来证明这一点。


对于某些疾病,如炭疽、埃博拉或霍乱(至少在一些国家),这些疾病在全球人口中并不常见(谢天谢地!),获得阴性样本不是大问题。然而,对于在某些个体中可能无症状传播的疾病(因此你认为是阴性的样本实际上可能代表阳性)或在人群中流行的疾病(因此找到任何阴性的样本都是一个挑战),这可能不是直接的。


神奇的底片和在哪里找到它们-来自一个意想不到的来源的帮助


对于许多人来说,说到“冰岛”,他们想到的是“权力的游戏”,“令人叹为观止的风景”或“没有人能发音的火山”。但冰岛也是一种非常特殊的马的家园——冰岛马。因其包括tolt在内的步态范围而受到重视,它们出口到世界各地。然而在美国,冰岛人已经1000多年没有进口过马了,这导致了一个基因隔离的种群的发展,而这并不是他们被隔离的唯一原因。作为一个岛国,冰岛在疾病控制方面有很大的优势,他们没有很多传染性疾病,比如困扰世界其他地方的马流感和马病毒性动脉炎。他们也缺乏窒息由细菌感染引起链球菌等美国武器装备),这是世界上其他地方的地方病,并被冠上最常诊断的马传染病的荣誉。


然而,对于许多传染性病原体来说,naïve人口意味着像绞杀这样的疾病进入人口,他们将面临很高的感染风险,因为他们缺乏事先的免疫力。因此,当2010年呼吸道疾病在马群中迅速蔓延时,人们担心这可能是一种这样的疾病。值得庆幸的是,罪魁祸首原来是一种已经存在于人群中的传染因子,链球菌zooepidemicus,亲戚美国武器装备尽管人们对这种病毒几乎没有免疫力,这就解释了其迅速传播的原因。


然而,在试图发现疾病的真正原因时,许多样本,包括血清,都是从冰岛马种群中提取并储存起来的。为了协助调查,来自MAST的Sigríður Björnsdóttir,冰岛食品和兽医管理局,来自冰岛大学实验病理研究所的Vilhjálmur Svansson, Keldur和他们的同事与动物健康信托基金会的细菌学团队合作,后者当时正在开发一种用于勒死的诊断性ELISA测试。


这种关系,以及与威康桑格研究所(Wellcome Sanger Institute)的合作,最终证明是全方位的。而冰岛队深入了解了疾病爆发的原因以及传播方式从收集到的细菌分离株的基因组分析中,冰岛血清样本也为勒喉酶联免疫吸附试验提供了理想的阴性对照(一旦确认勒喉不是这次爆发的原因——大家都松了一口气)。


Sigríður Björnsdóttir评论说:“我们的主要目标是减少和防止我们的动物遭受痛苦,这是一个主要的福利问题,并保护这个品种的可持续性。然而,我们已经认识到,保护人群对于为全世界马疾病的研究和测试生产提供阴性对照也是多么重要。我们很高兴处于这种情况。”


卡尔·罗宾逊博士,英国纽马克特动物健康信托基金会的高级科学家,相关研究的第一作者绞杀酶联免疫吸附试验的发表评论说:“虽然获得阳性样本用于评估测试并不是一个大的挑战,但阴性样本则更有问题。”他继续说:“这项测试是基于对马抗体水平的测量美国武器装备在感染后的一段时间内——甚至几个月——皮肤可能会保持升高。有些动物还会形成所谓的“带菌者状态”,在这种状态下,它们看起来非常健康,但却存在感染。这两个因素都意味着,在任何感染流行的人群中发现真正的阴性是一件真正令人头痛的事情。然而,在冰岛采集的血清样本提供了一组完美的阴性对照。”最终,这个真正的负面金矿导致了由动物健康信托基金提供并获得许可的勒喉测试的强有力验证,现在全球各地的实验室都在使用这种测试来帮助成千上万的马。

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Karen Steward博士
Karen Steward博士
高级科学作家
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