抗体在神经科学的前进
抗体是日常神经科学研究的一个重要组成部分。他们共同分析化验的中心,诊断测试,甚至被利用先进的疗法。但最近抗体也受到了外界的批评,高调的文章调用问题这些基本研究工具的可靠性和再现性。我们赶上Bio-Techne Raymond Chan和凯瑟琳·布拉德利找出提供者希望提高抗体,让他们更能适合未来神经科学。
Ruairi Mackenzie (RM):最常见的应用是什么抗体在神经科学吗?
雷蒙德·陈(RC):神经科学家使用抗体的主要方法是对immunodetection(如。免疫印迹、免疫细胞化学、免疫组织化学的目标。
RM:我们如何才能提高抗体使他们更加敏感的神经科学和特定的应用程序?
凯瑟琳·布拉德利(KB):神经组织具有更复杂和异构比其他组织细胞和分子组成。神经科学研究提高抗体的一种方法是设计和验证这些工具用于这个复杂的组织。选择抗体时,那些pre-validated将是一个明智的选择——利用产品数据表!
RM:最近的一个功能在自然界中手指直接对准抗体作为一个贡献者再现性危机。如何有效的索赔,以及我们如何提高抗体的再现性和有效性?
RC:索赔是非常有效的,特别是抗体是广泛使用,任何相关问题在科学界可以迅速普及。因此,使用不一致和多组抗体可以创建一系列问题在当前和未来的研究。
Bio-Techne,我们使用行业领先的抗体生产标准,它遵循从国际工作组抗体5-Pillar模型验证。这种方法对抗体的生产标准是基于5验证原则:
•比如CRISPR KO验证遗传策略
•基于non-antibody,正交方法如ACD RNAscope®伊什技术
•一个独立的抗体针对不同的抗原决定基
•使用标记或过表达的蛋白质
•生物或化学调制的蛋白质表达
你可以找到更多关于这些验证步骤在这里。
除此之外,研发系统——Bio-Techne品牌——39 HLDA-approved CD标记抗体克隆。以人类白细胞分化抗原(HLDA)研讨会,新CD分子抗体是由多个国际实验室包括严格的流程,blind-tested WB,包含IHC, IP,大,和功能的研究。进一步信息我们需要构建的步骤我们可以访问再现性的抗体在这里。
遵循以上步骤确保较高的验证、再现性,实现抗体和特异性,最大限度地发挥其潜力人员至关重要。
RM:我们理解大脑的拥有先进的巨大在过去十年的研究。抗体进展如何?
KB:我们看到需要抗体工作immunodetection整个组织样本的蛋白质。大脑的神经细胞彼此连接,有一个需要能够可视化这些神经网络为了得到一个更好的理解的神经发展变化发生在大脑病理。
神经科学家还需要验证工具的具体检测不同的蛋白质构象。许多神经退行性疾病的特点,如阿尔茨海默病和帕金森病,是不正常的大脑中聚合的蛋白质积累。虽然有方法来检测蛋白质总量(质谱),他们缺乏的能力,看他们在空间上下文。
RC:总体而言,抗体为神经科学设计目标正在不断发展和完善,我们更好地了解不同的哺乳动物大脑细胞生物学,神经网络,并且可以更好的设计免疫原,尤其是困难的目标,如膜蛋白。
在第一国际抗体验证会议上,一个问题生成受体抗体TrkB长大的会谈在奥胡斯大学神经科学实验室,丹麦。的研发系统TrkB抗体被证明非常有效免疫印迹、免疫染色(ICC和包含IHC)和IP,但只有从15个其他商业抗体没有结果后,在巨大的成本和时间。有时,精心设计和验证神经抗体可能因此已经存在,但实验室可能不知道。
最后,神经科学家也成功应用RNAscope伊什技术未满足的需求的许多目标,抗体还没有商业化,或不充分执行应用程序的兴趣。2200年使用RNAscope引用,650人(30%)的论文已经在神经科学领域。这说明需要我们看到改善和有效的抗体更神经科学的目标。
