没有污点免疫印迹

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没有污点西方墨点法指南

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Bio-Rad没有污点西方墨点法是一种简化的方法来获得更好的免疫印迹结果。没有污点的技术增加了速度,使质量评估在免疫印迹实验的每一步——从运行量化中蛋白质的凝胶。除了能力总蛋白正常化(TPN)而不需要执行额外的染色步骤;这种技术使研究人员能够实现更快的结果和更好的数据。

没有污点技术优于传统免疫印迹方法,因为它允许用户:

  • 可视化凝胶电泳后几分钟
  • 在每一步执行质量评估不需要额外的染色和使脱色
  • 提高准确性和通过总蛋白规范化产生可靠的定量结果

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没有污点西方墨点法工作流

1
迷你千变万化的利乐细胞免疫印迹
15分钟

单独的蛋白质

速度与灵活性:TGX没有污点凝胶化学可用预制和handcast格式

迷你千变万化的利乐细胞
迷你千变万化TGX没有污点凝胶

2
可视化蛋白质分离
可视化蛋白质分离

Pre-transfer凝胶图像

1分钟

可视化蛋白质分离

Coomassie-like性能没有背景的变化,没有染色/使脱色

没有污点使成像系统

3
蛋白质转移
可视化蛋白质分离

工作调动凝胶图像

3分钟

蛋白质转移

  • 快速、高效、统一的蛋白质转移
  • 吞吐量:转移4迷你或2 midi凝胶
  • 方便:选择现成的传输包(硝基或PVDF)

Trans-Blot涡轮增压输送系统

4
可视化蛋白质分离
可视化蛋白质分离

吸干凝胶图像

1分钟

评估传输效率

快速检验的质量转移邮寄成像凝胶转移

没有污点使成像系统

更快的阻塞、抗体孵育和污点检测工作流程:

工作流,使五分钟的阻塞、抗体孵育和污点检测大约4小时内,比传统的方法快!

EveryBlot阻断缓冲区

EveryBlot阻断缓冲区

5分钟可以阻止所有西方的屁股和最大灵敏度。

PrecisionAb验证西方墨点法抗体

PrecisionAb验证西方墨点法抗体

非常特殊和敏感主要为西方墨点法抗体被广泛验证。

StarBright蓝色荧光二次抗体

StarBright蓝色荧光二次抗体

敏感的荧光检测和背景非常低的单个或多个蛋白质在一个没有剥离或reprobing污点。

5

正常血清总蛋白和免疫印迹分析数据

简单的多路复用
用免疫印迹验证,非常具体PrecisionAb主要抗体和StarBright蓝色荧光二次抗体检测多个目标相同的污点。

图像实验室软件
可视化蛋白质分离

总蛋白与化学发光检测

可视化蛋白质分离

总蛋白和荧光检测

可视化蛋白质分离

没有污点污点(从步骤4)正常化

使用没有污点的好处污点的形象总蛋白加载控制

  • 然后就不需要带reprobe,减少污点
  • 更精确的归一化方法与传统方法相比,使用一个管家的蛋白质
  • 生产可靠和准确的定量

图像实验室软件

总蛋白正常化

图像实验室软件的截图

说明总蛋白质的标准化特征在图像实验室软件使用没有污点成像仪启用。

Bio-Rad没有污点的免疫印迹提供了一个实用、方便,可靠的方法来执行总蛋白质正常化。没有污点可以可视化标记蛋白质凝胶凝胶电泳后1分钟。没有污点污点可视化和图像采集只需要几秒使用一个没有污点成像仪启用。这种技术使研究人员更容易采用总蛋白质免疫印迹的加载控制。

总蛋白使用没有污点技术规范化

  • 使总蛋白在负载样品测量
  • 消除immuno-blotting干扰与HKP有关
  • 占变异在加载、电泳和转移

为什么没有污点总蛋白正常化优于其他方法吗?

使用传统的总蛋白质污渍会阻碍下游免疫印迹的可视化,通常需要重复染色和拘留措施的障碍阻止TPN的广泛适应性。没有污点的独特特征技术使成像总蛋白质的一个更好的方法定量免疫印迹。

  • 没有紫外线

  • 与紫外线

    凝胶没有没有污点技术 凝胶没有没有污点技术

在短暂紫外光激活,没有污点荧光染料凝胶的蛋白质分子共价结合,允许他们在凝胶成像反复或膜工作调动。

总蛋白规范化使用没有污点技术始终提供标量线性响应在更大的动态范围。

没有污点总蛋白为西方墨点法正常化

线性的比较没有污点的总蛋白测定和immunodetection三管家蛋白10 - 50μg海拉细胞溶解产物。左边是(a)的代表图片,没有污点污点和(b)的化学的屁股,β-actin;(c), GAPDHβ-tubulin和(d)。莱恩标签对应于总蛋白负荷(μg)。虽然肌动蛋白和微管蛋白信号出现线性,光密度比率远远低于实际加载的预测“定量反应”而没有污点信号与预期的结果(e)。

参考
泰勒SC Posch (2014)。定量免疫印迹实验的设计。生物医学Res Int。36岁,1590年

没有污点技术使科学家想象强大背景的凝胶和较低的总蛋白信号的屁股,否则不可能没有额外的染色步骤因此,改善整体的动态范围,而不需要执行额外的染色和使脱色步骤。

  • 没有污点技术

    凝胶技术没有污点
  • 没有没有污点技术

    凝胶没有没有污点技术

在凝胶比较高背景和低背景信号。没有污点技术显著降低了背景信号相比,传统的总蛋白检测方法。

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