组合颜色编码*

当使用MHC多聚体来研究抗原T细胞,每个MHC /肽检测,只有一小部分T细胞特定的肽。因此,对于大型筛选一些特异性的比例需要大量血液或样本。为了解决这个问题,一个优秀的策略是使用“组合颜色编码”¹。方法在代码分配一个独一无二的双色由每个四聚物/肽的兴趣。两个四聚体标记,不同的颜色会与细胞受体结合,产生一个特定的T细胞,可以在流式细胞分析仪检测到两个渠道。通过分析双阳性细胞可以识别这些细胞识别的肽。

四聚物的数量/肽组合,可用于同时取决于有多少荧光团用来组装四聚体。使用5种不同streptavidin-fluorophore配合允许10个独特的双色组合(浅蓝色区域,表1)。使用6配合,代码扩展到15(红色区域,表1)。代码增加轭合物数量的增加。因此,当你增加所使用的颜色,可以覆盖更多的特异性和更少的样本是必需的。使用BioLegend的Flex-T™技术允许一个有效的和负担得起的解决方案抗原T细胞多筛选。试剂的成本远低于其他商用产品。此外,我们提供内部,自定义筛选。请联系我们的自定义解决方案团队报价:cst@biolegend.com。

1)Hadrup老等。平行检测抗原t细胞反应的多维编码MHC多聚体。Nat方法。2009年7月,6 (7):520 - 6。

的Flex-T™产品和它的使用是在多个国家专利保护,特别是家庭被PCT专利出版物我们2006/080837,我们2010/060439。我们2006/080837声称盖等UV-conditional peptide-MHC交换。我们2010/060439声称封面等组合编码MHC检测系统。

协议

Flex-T™固定肽四聚物制备和流式细胞术染色协议

协议荧光四聚物生成和细胞染色

协议的传奇人物马克斯™FLEX-T人类类我肽酶联免疫试剂盒

协议为HLA类我ELISA评估肽交换

我们Flex-T™试剂包括生物素化的单体含有UV-labile肽或预装固定肽,ELISA试剂评价肽交换的效率,和定制的单体和四聚体。点击下面的每一个产品族查看可用产品的完整列表。

鼠标类我生物素化的单体——固定的肽

人类类我生物素化的单体——UV-labile肽

人类类我生物素化的单体——固定的肽

ELISA试剂

定制的单体和四聚体

请填写订单定制产品自定义Flex-T™申请表

试剂仅供研究使用。任何使用的试剂为商业应用程序需要一个额外的许可协议。请联系BioLegend业务发展为更多的信息。

人类类我生物素化的Monomer-SARS-CoV-2固定肽(25µg)
Flex-T™生物素抗原SARS-CoV-2膜蛋白单体
Flex-T™生物素抗原SARS-CoV-2核衣壳单体
Flex-T™生物素抗原SARS-CoV-2 ORF1ab单体
Flex-T™生物素抗原SARS-CoV-2 ORF3a单体
Flex-T™生物素抗原蛋白单体SARS-CoV-2飙升

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鼠标类我生物素化的单体——固定肽(25µg)
Flex-T™生物素2 D (b)单体
Flex-T™生物素2 K (b)单体
Flex-T™生物素2 K (d)单体

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人类类我生物素化的单体——UV-labile肽	大小
Flex-T™抗原* UVX 01:01单体	50µg
Flex-T™抗原* UVX 02:01单体	50µg | 200µg
Flex-T™抗原* UVX 02:03单体	50µg
Flex-T™抗原* UVX 03:01单体	50µg
Flex-T™抗原* UVX 11:01单体	50µg
Flex-T™抗原* UVX 24:02单体	50µg
Flex-T™HLA-B * UVX 07:02单体	50µg
Flex-T™HLA-B * UVX 08:01单体	50µg
Flex-T™HLA-B * UVX 15:01单体	50µg
Flex-T™HLA-C * UVX 04:01单体	50µg
Flex-T™HLA-C * UVX 07:01单体	50µg
Flex-T™HLA-C * UVX 07:02单体	50µg

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ELISA试剂	大小
传说马克斯™Flex-T™人类类我肽酶联免疫试剂盒	1预涂板
纯化链霉亲和素	250年µg
合反β2-microglobulin抗体	50µg
Flex-T™ELISA积极控制	20µg

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自定义Flex-T™试剂	大小
Flex-T™定制HLA单体	50µg | 200µg
Flex-T™定制HLA四聚物	50个测试| 200测试
Flex-T™定制鼠标单体	50µg | 200µg
Flex-T™定制鼠标四聚体	50个测试| 200测试

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有用的链接

生物之间的协作部门和卫生信息学,免疫学和微生物学的部门,从哥本哈根商学院,哥本哈根大学的研究所和拉霍亚过敏和免疫学,导致软件预测peptide-MHC类我绑定使用人工神经网络(ann)。在这里您可以测试一个肽序列:http://www.cbs.dtu.dk/services/netmhcpan - 4.0 /

参考:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/28978689

免疫抗原决定基数据库(IEDB)是一个免费的资源NIAID的预测和分析抗原表位。数据库收集实验数据,包括数据集出版,对T细胞和抗体抗原表位与传染性疾病、过敏、自身免疫、移植等。使用工具:https://www.iedb.org/home_v3.php

MHC抗原肽:https://www.biolegend.com/en-us/antigen-peptides

MHC四聚体是什么,你能做什么呢?

定义的T细胞介导的免疫反应是抗原呈递细胞和T细胞之间的相互作用,通过主要组织相容性复合体(MHC)和T细胞受体(TCR)。MHC分子呈现出这个肽肽抗原T细胞识别。可溶性,单体的MHC分子结合很弱的细胞。然而,通过一个四聚物通过荧光标记链霉亲和素共轭,复杂的几个细胞结合,创造一个更稳定的互动,使其可用于流仪检测抗原特异性T细胞。

什么是Flex-T™吗?

Flex-T™(Flexible-Tetramers) BioLegend可溶性MHC产品线的品牌名称。它包括单体、紫外线(UV)肽交换技术,和所有相关的产品和应用程序。

购买生物素化的单体有什么优势?

是的,相同的单体可以组装不同的链霉亲和素配合,为颜色选择提供了极大的灵活性。

此外,它可以储存冷冻和四聚物聚集前不久实验。这增加的存储时间试剂。

肽是什么交换技术和使用它的优势是什么?

Flex-T™MHC单体含有肽可以退化的紫外光源的使用。这允许肽交换时,紫外线照射在感兴趣的肽的存在(这不是UV-labile)。这种灵活性允许任何感兴趣的肽的筛选与足够的亲和力MHC基因装上。

紫外线源的规格是什么?

紫外线灯,长波紫外线源(365 nm, 8瓦或类似)。光源应该允许样本被放置2 - 5厘米的灯。

我怎么评价肽交换的效率?

按照协议为HLA类我ELISA。分析积极控制可以单独购买(猫# 280301),它可以稀释高,中,低浓度。信号强度可以相关肽的亲和力。

有肽长度建议吗?

肽没有特殊要求。缩氨酸自然结合MHC分子会绑定到Flex-T™试剂。我类分子,典型的长度大约是8 - 10个氨基酸。二类分子适应长肽,大约14 - 20氨基acids1。

1)Mohan摩根富林明和Unanue ER。非常规识别多肽的T细胞和自身免疫的影响。Nat Immunol牧师。2012年10月,12 (10):721 - 8。

我需要知道UV-labile肽的序列?

UV-labile肽的序列不需要使用试剂。没有肽MHC分子不稳定,所以这些肽只是用于两个目的:稳定MHC分子,作为一个占位符替换的肽。

如果我仍然“固定”肽感兴趣,你有什么建议吗?

请参见有关文件名为“肽序列”。文档包含一个表与常用的肽等位基因研究抗原特异性T细胞。

我感兴趣的小说肽相反,有什么资源呢?

有大量的数据库和网页可以帮助,这里就是其中之一:https://www.iedb.org/。

不仅可行筛选多肽,而且一些特异性的抗原特异性T细胞在一个样品吗?

与传统的预四聚物的方法,这是很难做到,不划算。与Flex-T™技术组装的四聚体有更大的灵活性,它是容易的,负担得起的几个specificities2屏幕示例。为了促进这种方法,一个组合的颜色编码系统。请访问Flex-T™biolegend.com/flex-t,组合颜色编码标签的网页详细描述关于如何做到这一点。

2)Hadrup SR et al .平行检测抗原t细胞反应的多维编码MHC多聚体。Nat方法。2009年7月,6 (7):520 - 6。

你们有提供鼠标单体或四聚体吗?

目前还没有。

你提供定制的产品和服务吗?

是的,请联系我们的自定义解决方案团队与您的请求在cst@biolegend.com,或者联系你的当地BioLegend代表。

是Flex-T™产品专利保护?

的Flex-T™产品和它的使用是在多个国家专利保护,特别是家庭被PCT专利出版物我们2006/080837,我们2010/060439。我们2006/080837覆盖等UV-conditional peptide-MHC交换。我们2010/060439覆盖等组合编码MHC检测系统。

的Flex-T™产品远销非商业研究有限使用许可证(Flex-T™️特定的有限使用许可)为其他用途,可以从Sanquin获得许可证。请联系reagents@sanquin.nl为更多的信息。