“我已经使用各种辅助和杰克逊ImmunoResearch一直是最好的。荧光团明亮和稳定及其选择性(x反应删除)中学一直显示在多个物种特异性标记。”
珍妮特•Duerr俄亥俄大学评分:5.0
骆驼科(羊驼,骆驼,骆驼,骆马和南美)产生两个非规范免疫球蛋白与传统IgG1。IgG2和IgG3被称为重链(或重链)抗体。他们有单独的域结合位点(VHH)和不含CH1域或光链。VHH抗体驯良的特点使其有用的在许多医疗应用如癌症诊断和治疗。
阅读更多关于非规范免疫球蛋白在骆驼科物种。
JIR发展Anti-Alpaca免疫球蛋白,子类和VHH域二次优化VHH抗体(单畴)抗体发展和应用。
高亲和力VHH抗体的发展遵循上面所示的行之有效的途径。
JIR Anti-Alpaca抗体可以利用在特定阶段的发展加快,提高高亲和力VHH抗体。
发现高质量的成功和速度VHH候选人的保真度和效用优化每一步使用的工具。
杰克逊ImmunoResearch Anti-Alpaca免疫球蛋白(H + L)和Anti-Alpaca免疫球蛋白,子类2 + 3适合检测羊驼和骆驼免疫球蛋白。
图1和图2详细的检测免疫球蛋白子类从物种通过免疫印迹。从血清免疫球蛋白子类纯化使用方法从马斯河et al .(2007)分离非还条件下通过SDS /页面。墨迹是探测与二次抗体。
工程VHH抗体的发展可以由免疫一个羊驼或骆驼感兴趣的蛋白质。监测免疫反应使研究人员能够收获PBMCs最佳时间,体内成熟后导致了不同的特异性。
JIR anti-alpaca二级抗体可以用来区分总免疫球蛋白和抗体重链在骆驼科血清免疫疗法。重链(子类2和3)抗体反应可能不同于总免疫球蛋白,成熟和收获PBMCs生产VHH抗体重链()可以优化。
血清转换(抗原抗体滴度)可以通过ELISA或流式细胞仪监控/流式细胞仪(原谅et al ., 2014)。JIR Anti-Alpaca免疫球蛋白(H + L)可用于监视pre-immune和post-immune血清转换。JIR Anti-Alpaca免疫球蛋白g 2 + 3是适合测量重链抗体血清转换,使最优时机PBMC收获VHH图书馆建设。
图3显示的生成总免疫球蛋白重链抗体可能不是预测的读数。与感兴趣的蛋白质免疫后,ELISA用于描述特定的抗体反应。感兴趣的蛋白涂在ELISA板,抗血清作为主要抗体来源,peroxidase-conjugated二级抗体128-035-160或被用来检测免疫球蛋白g和免疫球蛋白2 + 3,分别。免疫球蛋白g总效价可能建议收获点150天,但IgG2和3的反应不是最佳免疫后直到300天。
检测可能需要在筛选VHH发展阶段,以及下游的应用程序。直接检测使用一个次要VHH抗体特定的,而不是通过一个标记添加到N -或VHH糖基,在许多应用程序可以提供优势。例如,使用anti-VHH域通过净化His6等标记抗体检测上,减少背景从内源性蛋白同源性与标记抗原决定基分享。在西方墨点法,Anti-Alpaca VHH抗体使目标检测的rVHH其他蛋白质的存在。当检测重组蛋白从细胞培养媒体或细胞溶解产物,Anti-Alpaca VHH抗体显示显著减少非特异性抗体检测与anti-His6相比(图4)。
屏幕的能力或量化VHH表达式之前净化加速发现和生产。然而,VHH的数量相对于总蛋白在细胞溶解产物可能是非常小的,难以可靠的特征。通过瞄准VHH域,山羊Anti-Alpaca免疫球蛋白VHH抗体删除的域名需要猜测或标签。如图5所示,这些多克隆抗体可以检测VHH高敏感性和特异性的细胞溶解产物。
| 二次抗体 | 代码 |
|---|---|
| 山羊Anti-Alpaca免疫球蛋白(H + L)* | 128-005-003 |
| 山羊Anti-Alpaca免疫球蛋白(H + L) (min X Bov,胡女士,Rb,老老鼠Prot)* | 128-005-160 |
| 山羊Anti-Alpaca免疫球蛋白g, 2 + 3具体的子类(min X Bov,胡女士,Rb,老老鼠Prot)* | 128-005-229 |
| 山羊Anti-Alpaca免疫球蛋白,VHH域(min X Bov Sr Prot) | 128-005-232 |
| 山羊Anti-Alpaca免疫球蛋白,VHH域(min X Bov,胡女士,Rb,老老鼠Prot) | 128-005-230 |
*这些抗体反应主要与Fc地区,不推荐用于检测VHH抗体(nanobodies __)。
