是的,IsoFast™Bst聚合酶可以通过加热灭活管在> 80°C 10分钟。

是的,酶活性之间50°C和70°C,之间有一个最佳的60°C和65°C。我们不推荐使用它在温度大于70°C,因为它变得热灭活。

不幸的是没有,作为酶的反应温度太高的稳定性。

是的,IsoFast™Bst聚合酶可以有效替代的DNA聚合酶I(大片段为这些应用程序。

限制性内切酶反应后,DNA分子的最后部分可以直言不讳,与5′过剩(3′休会结束)或3 '过剩(5 '休会结束)。

IsoFast™Bst聚合酶显示只有5 ' 3 '聚合酶的活动,但没有5到3或3 ' 5 '核酸外切酶活性(即聚合酶没有校对活动)。因此,它只能用于填写5的悬臂(生成钝端),但不删除3′悬臂或5的负担,因为它缺乏核酸外切酶活性。

是的,但是当dUTP取代50%以上的dTTP在反应中加入显著抑制。

是的,它可以使用片段开始在尼克链合成引物3′端。由于链置换活动,它可以在年底前或直到分离DNA分子。

是的,但它太低用于逆转录的应用程序。对于一些引物集和目标IsoFast™Bst聚合酶可能用作single-enzyme (RT / DNA聚合酶),但我们建议使用一个专用的逆转录酶在IsoFast™Bst互译混合。

20 x的插层提供荧光染料浓度。建议每25 1.25μlμl反应时实时监测反应在大多数qPCR仪器。厘清共同实时荧光计的通道可以用来阅读染料。

放大任何目标的变化取决于几个因素,包括引物设计,模板质量和数量。一般来说,包在IsoFast™Bst范围将取得积极成果5至30分钟。

是的。缓冲和已经包含混合核苷酸,所以没有必要单独核苷酸顺序。

IsoFast™Bst聚合酶DNA聚合酶有很好的链置换活动。因为它已经被孤立于中度嗜热的芽孢杆菌stearothermophilus(最近更名为Geobacillus stearothermophilus),60 - 65°C的最佳温度高于我,DNA聚合酶之一大片段或phi29聚合酶(37°C)之一,其他常用的链取代聚合酶。

这是有用的设计测序策略以及等温扩增技术。例如,较高的反应温度有利于测序通过GC富裕地区。