介绍西方墨点法

西方墨点法是一种功能强大的技术,它允许你积极检测蛋白质,估计量,并确定他们的分子量。从一个起始蛋白质从细胞或组织中提取的混合物。

整个西方墨点法工作流包括几个单独的步骤,每一个都是生产高质量的关键数据。

这个学习中心提供了理论和实践的深入的信息免疫印迹过程的每一步,从样品制备分析最终的污点

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  样品制备

  细胞包含您感兴趣的蛋白质必须被完全溶解,以保证高收益而删除非蛋白成分的细胞。好的样品制备技术保证下游蛋白质仍未损坏的分析。

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  电泳

  电泳分离的蛋白质样品并提供分子量数据检测蛋白质在随后的检测。

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  转移

  分离蛋白质从凝胶转移到膜固定化。高效的蛋白质转移需要最大的免疫印迹的敏感性。

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  检测

  好的,干净的西方依赖于抗体的特异性和敏感性。除了特定蛋白质的检测,样品中总蛋白也可以可视化与总蛋白质污渍或新技术,消除需要染色,使脱色。

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  图像采集

  精确成像的免疫印迹下游捕捉污点数据分析是至关重要的。理解基本成像概念如灵敏度、分辨率,背景噪音的来源可以帮助你最大限度地提高图像数据的质量。

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  图像分析和量化

  免疫印迹丰富的图像信息。一些实验只需要一个定性的答案,但适当的设计和执行免疫印迹实验还可以提供定量数据之间的相关蛋白表达样本。