葡聚糖等多糖结构说明使用OMNISEC Multi-Detection GPC

介绍

最初在1861年由路易·巴斯德发现,葡聚糖是一种多糖,发现各种各样的应用程序,主要在医疗领域,由于其副作用最小,在媒体水溶解度。这些应用程序从滴眼剂润滑剂到静脉肠外营养和抗血栓形成的代理解决方案组件,降低血液粘度,防止血液凝结。这些药物的应用程序的上下文中,每个葡聚糖样品的分子量决定其行为。例如,右旋糖酐和样品分子量大于60 kDa不容易从血液,从而表现出血液稀释效果更长一段时间比低分子量的版本。最近,最常见的右旋糖酐dextran-40抗凝治疗,与40 kDa的分子量。此外,一种罕见的但潜在负面的副作用右旋糖酐是急性肾功能衰竭,这可能是由右旋糖酐的固有粘度的影响,因此它的结构。因此,准确分析和分子量右旋糖酐样本的特征是至关重要的。

凝胶渗透色谱法(GPC),或者说等价于凝胶排阻色谱(SEC)是一种广泛使用的技术描述各种各样的大分子,从大部分天然聚合物和蛋白质合成聚合物。这种技术可以用来测量分子量的时刻,分子量分布,这些大分子的特性粘度和水动力大小。图1显示了一个完整的GPC /秒的系统设置。

图1:莫尔文的OMNISEC三重检测GPC /秒的系统

GPC /秒的简短描述

溶剂化样本是由液体流动相通过分析柱的多孔凝胶粒子,diffusion-controlled大分子组件发生分离,最终观察到不同的探测器每片样品洗提。常见的先进检测GPC /秒设置包括折射率、粘度计、光散射检测器。

本应用笔记将描述一系列右旋糖酐的分析样品分子量从1 - 650 kDa。结构比较其他多糖、阿拉伯胶和果胶。

GPC的结果

十个右旋糖酐样本准备GPC /秒分析0.05 Na的水流动相₂所以₄。样品进行了分析使用两个A6000M列和1毫升/分钟的流量。图2显示了折射率为所有十葡聚糖样品色谱和LogMW情节。LogMW情节的不断下降说明分子量的范围,从约kDa到超过1000 kDa。

图2:覆盖的折射率色谱和LogMW情节的葡聚糖样品

强调三倍的性能检测,样品的色谱Dex7在图3中显示了示差折光检测器信号红、粘度计信号蓝色,直角光散射(、)信号在绿色和低角光散射(lal)黑色。每个保留体积的计算分子量也是黄金可视化所示样品的分子量分布。

图3。三重探测器Dex7样品的色谱图;LogMW显示为金线

表1给出了分子右旋糖酐系列的样本获得的数据。价值观包括分子量的时刻(M_n,米_w,米_z、固有粘度(η)),和水力半径(R_h)。

表1:分子右旋糖酐样本数据导出

样品标识	米n(Da)	米w(Da)	米z(Da)	PDI	(η)(dL / g)	Rh(nm)	dn /直流
Dex1	1109年	1278年	1486年	1.152	0.0368	0.895	0.15
Dex2	4312年	5553年	7319年	1.288	0.0705	1.797	0.15
Dex3	9677年	12220年	17820年	1.263	0.1048	2.664	0.15
Dex4	21200年	24190年	27800年	1.141	0.1543	3.852	0.15
Dex5	42480年	49520年	58750年	1.166	0.2213	5.503	0.15
Dex6	70700年	84530年	104400年	1.196	0.2840	7.127	0.15
Dex7	125400年	153000年	207800年	1.220	0.3790	9.527	0.15
Dex8	206200年	269000年	425000年	1.305	0.4633	12.18	0.15
Dex9	292100年	412000年	614300年	1.411	0.5045	14.36	0.15
Dex10	456500年	658500年	1087000年	1.443	0.6045	17.74	0.15

表1中的数据确认趋势如图2所示:分子量、分子大小和每个葡聚糖样品的特性粘度增加整个系列。另一种方法来查看这些趋势是观察Mark-Houwink情节,如图4所示。Mark-Houwink图显示了在每个M(η)的样本_w在整个分子量分布。样品也有类似的结构,但不同的分子量,应该Mark-Houwink情节沿着同一条直线下降。正如所料,Mark-Houwink情节的葡聚糖样品重叠,形成一条直线,范围从低于1000哒超过1000000哒。

相比之下,样本具有不同分子结构将存在于不同的空间Mark-Houwink情节,根据其分子密度。更密集的样品在溶液中表现出较低的固有粘度和存在接近图的底部,而密度较低的样品表现出更高的固有粘度(如有可能引起急性肾功能衰竭的问题右旋糖酐)存在前茅。强调这个概念,阿拉伯树胶样本和果胶样品进行了分析比较。阿拉伯树胶样本,是一个天然胶物质,密度比右旋糖酐,Mark-Houwink低于右旋糖酐系列的阴谋。果胶,通常用作胶凝剂,Mark-Houwink阴谋的存在高于右旋糖酐。这意味着,对于两个样品相同的分子量,果胶会有更高的粘度(作为胶凝剂预期)。

图4。Mark-Houwink叠加的右旋糖酐系列(中央集群线)、阿拉伯树胶(底部)和果胶(上)样本

结论

莫尔文的OMNISEC三重检测GPC /秒系统提供优秀分子表征一系列右旋糖酐样本的数据分析分子量从大约超过650 kDa kDa。使用Mark-Houwink情节结构一致性证明的样本。阿拉伯胶和果胶样品进行分析来说明样品之间的结构差异,可以观察到。这些测量提供的数据,研究人员现在拥有更大的洞察力的分子特征定义的行为这些不可或缺的材料,可以更精确地控制关键参数如分子量和结构。这允许更好的针对右旋糖酐产品和成绩为他们最适合的应用程序。