三维细胞培养系统研究肿瘤间质相互作用

作品简介:
本文描述了一种新型的3D共培养模型，使用非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系与肺成纤维细胞结合。

方法:
自动化兼容的多孔悬滴微量滴定板用于3D单培养和共培养。在这些悬液中，两种NSCLC细胞株A549和Colo699单独培养或与肺成纤维细胞共培养。用Annexin V/碘化丙啶染色流式细胞术检测5天和10天后肿瘤球体的生存能力。用扫描电镜、半薄切片、荧光显微镜和免疫组化对肿瘤成纤维细胞球形的形成进行了表征。除常规组织学外，免疫组化检测E-Cadherin、vimentin、Ki67、纤连蛋白、细胞角蛋白7和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达。

结果:
A549单株培养力低于共培养，而col699单株培养力高于共培养。在两种肿瘤细胞系中，Ki67的表达在单培养和共培养之间有显著差异。在培养过程中可以检测到波形蛋白的增加和E-Cadherin表达的减少，这表明向间充质表型的转变。此外，成纤维细胞系仅在与癌细胞系A549共培养时才表现出α-SMA的表达，从而表明间充质细胞向间充质细胞转变为更具有肌成纤维细胞表型。

结论:
我们证明，我们的方法是一个有前途的工具，肿瘤球体共培养生成。此外，这些球体允许研究肿瘤-基质的相互作用，并更好地反映癌细胞在其微环境中的体内条件。我们的方法有可能有助于抗癌药物的开发，并支持生物标志物的搜索。

这篇文章,开发一种创新的3D细胞培养系统，用于研究非小细胞肺癌细胞中的肿瘤-基质相互作用，发表在PLOS ONE上，可免费获取。