化学家设计便宜,台式细胞标记和选择的方法

他们的新方法允许科学家标记添加到特定的细胞,这些细胞可能很容易定位和/或选择从一个更大的细胞群。

描述的技术,在最近一期的《化学期刊《应用化学国际版,利用廉价的两种蛋白质的紧密绑定获得但不是发现在人类或其他哺乳动物细胞。因此,它对现有的cell-marking技术优势。

“这新技术是便宜,容易敏感,“TSRI研究所教授理查德·a·勒纳说,他是这份新报告的资深作者。“方法应该是有用的在各种各样的应用程序,需要分离出特定类型的细胞。”

寻找一个更好的方法

最著名的细胞标记在使用中今天是GFP(绿色荧光蛋白),水母蛋白质,散发出一种独特的绿灯时被其他某些波长的光。当科学家们想要添加一个新的基因细胞,例如产生治疗性蛋白质,他们常常构造一个基因序列,还包括GFP基因。因此成功的细胞产生新的蛋白质也会产生GFP,其荧光甚至允许将这些细胞识别和排序从一个更大的人口。

但是荧光技术细胞排序比较昂贵和繁琐。替代cell-marking技术使用分子标记抗体或金属将紧密结合,但这些都是倾向于对细胞产生不必要的副作用,马克。Lerner的团队,由第一作者彭英杰,博士后,着手创造一个更好的方法。

新方法利用几丁质酶酶的特殊属性,它进化到分解chitin-a艰难,来自糖类物质发现,例如,在蟹壳,鱿鱼喙和真菌的细胞壁。除了一个主要chitin-breaking域,几丁质酶有另一个活跃的结构,一个“几丁质结合域”(ChBD)。“它使甲壳素的超强债券,”彭说。近年来,科学家们已经开始使用这种高亲和性结合ChBD和几丁质作为标记系统,通常选择ChBD-tagged蛋白质在实验室培养皿。新方法使用ChBD马克和选择细胞。

一个强大的工具

在基本技术,一个新的基因可以添加到细胞在一个更大的DNA载体,其中还包括ChBD和绿色荧光蛋白的基因序列。ChBD分子会产生以这样一种方式,它最终被关押在宿主细胞的外表面等离子体膜和膜内的绿色荧光蛋白分子将坐。GFP作为视觉航标,ChBD细胞作为一个方便的扣人心弦的点的选择。

暴露后的文化测试细胞实验ChBD-containing向量,科学家们能够看到,通过GFP标记的细胞表达它们,并且能够方便地选择它们具有灵敏度高,使用磁珠涂上了甲壳素。“这是一个相对容易的台式方法,”彭说。重要的是,这些选择的细胞可以产生子代细胞似乎正常和健康的。

因为ChBD标记,在矢量,产生一种锚细胞膜,它还可以作为一个强大的工具来选择膜的细胞样品材料。彭和他的同事们展示了用甲壳素珠子快速分离出纯的膜材料从ChBD-marked测试细胞。

纤维素酶,无处不在的植物化合物分解纤维素的高亲和性cellulase-binding域也有一个,可以使用相同的方式ChBD。

科学家预计,新的cell-marking方法将有助于简化另一个主要的分子生物学技术,勒纳实验室是这方面的先驱与格雷戈里爵士的集团在英国冬天的分子生物学实验室。这种技术可以让科学家产生非常大的和不同的抗体库的手臂,和筛选,或“锅”——黄金矿工锅掘金对那些可能使用,例如在疗法。ChBD-based标记应该是有用的在提高效率的平移过程中,彭说。

Lerner实验室也是调查的潜在使用ChBD-based细胞标记在活的动物,例如跟踪选定的细胞类型的命运在动物的寿命。