在黑暗中可以发光的分析可以帮助诊断病毒性疾病

尽管最近的进展,但许多高度敏感的诊断测试对于病毒性疾病仍然需要复杂的技术准备样品或者解释结果,使他们不切实际的医疗点设置或地区很少有资源。但是现在,一个团队报告在ACS中央科学开发了一个敏感的方法,分析病毒核酸在20分钟,可以在一个步骤完成“在黑暗中可以发光的蛋白质。

萤火虫的闪光,琵琶鱼的幽灵般的蓝色发光的诱惑和phytoplankton-covered海滩都是由相同的科学现象称为荧光。包括荧光素酶蛋白的化学反应导致发光,在黑暗中可以发光的效果。荧光素酶蛋白已经纳入传感器发出一个容易观察光当他们发现他们的目标。这种简单性使得这些类型的传感器快速检测的理想,但到目前为止,他们缺乏所需的令人难以置信的高灵敏度的临床诊断测试。基因编辑技术称为CRISPR可以提供这种能力,但它需要许多步骤和额外的专用设备检测所能低信号在一个复杂的、嘈杂的样本。所以,Maarten Merkx和他的同事们想用CRISPR-related蛋白质,但把它们与生物荧光技术可以检测到信号的数码相机。

以确保有足够的RNA或DNA分析样本,研究人员重组酶聚合酶放大(区域),执行一个简单的方法,在恒定的温度约100 F。与新技术,叫做LUNAS(发光核酸传感器),两个CRISPR / Cas9蛋白质特定病毒基因组的不同的相邻部分每个附加不同的荧光素酶片段。如果一个特定的病毒基因组,研究人员测试,两个CRISPR / Cas9蛋白质会绑定到目标核酸序列和相互接近,允许完整的荧光素酶蛋白的存在形式和蓝光发光化学基质。占该衬底被使用,研究人员使用一个控制反应,照耀绿色。一根管子从绿色变成蓝色表示一个积极的结果。

当从鼻拭子检测临床样本收集,RPA-LUNAS成功检测到SARS-CoV-2 RNA在20分钟,即使在浓度低至每微升200册。研究人员说,这本化验检测潜力巨大许多其他病毒有效和容易。

参考:Van Der转向HJ,范Aalen EA Michielsen CMS, et al。在黑暗中可以发光的传染病诊断使用CRISPR-Cas9-based分裂荧光素酶互补。ACS分Sci。2023年3月15日在线发表:acscentsci.2c01467。doi:10.1021 / acscentsci.2c01467

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