大规模植物细胞培养的低温贮藏功能基因组学

文摘

悬浮细胞系为基因工程植物物种是有用的。然而,这些线是费力的维护,包括常规接种,并影响转基因线的广泛使用,尤其是当许多行所需的高通量功能基因组学的应用程序。低温贮藏的这些线可以减少接种的必要性。这里,我们建立了一个简单的协议的低温贮藏细胞系从五个常用的植物种类,拟南芥,胡萝卜胡萝卜,Lotus多糖类化合物,烟草,和栽培稻。太阳能发电解决方案(2 M甘油、蔗糖0.4米和86.9毫米脯氨酸)在冻结保护细胞免受损伤,只是轻微毒性细胞保存在室温下至少两个小时。100多个样本同时冻结处理。起初,我们决定使用可编程的冰箱低温贮藏的条件;然后,我们开发了一个简单的协议,它不需要修改一个可编程的冰箱。简单的协议,厚发泡聚苯乙烯(EPS)容器包含这个瓶细胞/ LSP溶液保持在-30°C 6小时缓慢冷却细胞(预冻结);样本EPS容器被陷入液氮长期储存。 Transgenic Arabidopsis cells were subjected to cryopreservation, thawed, and then re-grown in culture; transcriptome and metabolome analyses indicated that there was no significant difference in gene expression or metabolism between cryopreserved cells and control cells. The simplicity of the protocol will accelerate the pace of research in functional plant genomics.

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