Immuno-CRISPR化验诊断移植排斥反应
当一个病人接受肾移植,医生仔细监视他们拒绝在几个方面的迹象,包括活检。然而,这个过程是侵入性和后期只能检测问题。现在,研究人员报告在ACS的分析化学已经开发出一种CRISPR-based化验可以敏感和无创性检测尿液中急性肾脏排斥的生物标志物。这可能有一天早些时候帮助诊断排斥,没有活组织检查。
肾移植受者必须服用免疫抑制剂药物的余生来帮助阻止他们的免疫系统攻击外国器官。然而,肾脏排斥仍然可以发生,特别是在移植后的最初几个月,被称为急性排斥反应。症状包括增加血清肌酐水平和症状,如肾脏疼痛和发烧。目前,明确诊断的唯一途径是通过活检,但这个过程只能在相对较晚的阶段发现问题。能够敏感和无创性诊断肾脏排斥在早期将允许医生开始抗排斥药物。研究人员先前发现,高水平的细胞因子蛋白CXCL9在肾移植患者的尿液是排斥的早期预警信号。但目前的方法测量CXCL9(酶联免疫吸附试验、ELISA)尿液中不工作很好,限制了其灵敏度。所以,乔纳森•多迪克和他的同事想要开发一个更敏感的技术从尿液无创性诊断急性肾拒绝。
研究人员他们的检测方法基于CRISPR / Cas12a基因编辑技术。在CXCL9蛋白质的存在,CRISPR / Cas12a削减酶探针产生荧光信号。研究人员提高荧光信号通过附加一个DNA条形码,聚集了大量的CRISPR / Cas12a分子,并随后被绑定到一个抗体识别CXCL9。重要的是,不像其他CRISPR-based检测方法,PCR扩增不是必需的,这使得该方法容易适应一种设备,可以在医生的办公室或甚至一个病人的家。当测试尿液样本来自11个肾移植患者,新系统准确地测量CXCL9水平,用ELISA值非常相似。然而,由于immuno-CRISPR系统比一个ELISA敏感的7倍,它可以检测肾移植排斥在非常早期的阶段,研究人员说。
参考:李我Kwon SJ Sorci M,多迪克Heeger PS, JS。高度敏感immuno-CRISPR CXCL9检测试验。肛门化学。2021;93 (49):16528 - 16534。doi:10.1021 / acs.analchem.1c03705
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