使用没有污点技术定量免疫印迹

奥尔德林博士戈麦斯博士,加州大学戴维斯分校的副教授,发表演讲,题目是“西方的屁股可以信任吗?“罗宾·墨菲博士,博士,副教授拉筹伯大学的维多利亚,澳大利亚,讨论了使用没有污点总蛋白质的加载控制进行单细胞蛋白免疫印迹。

恢复信任

戈麦斯的博士说话解决常见的免疫印迹痛点也在Biocompare进行的一项调查,发现41%的科学家说,他们的屁股不能25%的时间。“我们有多个问题的免疫印迹水平阻碍,让位给质量差的屁股和不准确的结果,”戈麦斯说在他的演讲。

戈麦斯博士说最常见的陷阱防止定量西方的屁股未能验证抗体,为规范化使用管家蛋白,对电影的依赖。出于这个原因,戈麦斯博士采用了Bio-Rad V3西方工作流™,它允许他执行墨迹在三个小时内一次抗体已被验证。V3工作流使用总蛋白质标准化和没有污点启用ChemiDoc™议员数码成像仪改善吸干定量。戈麦斯博士说这种方法有几个优点在使用电影,他在他的演讲的详细讨论。

会没有污点

墨菲博士讨论了上进行量化的挑战西方的污点样本个体的肌肉细胞。

通过使用四点校准曲线,墨菲博士说西方墨点法可以精确测量细微变化的蛋白质数量甚至单个细胞。使用Bio-Rad标准™TGX没有污点™预制凝胶,她能使西方墨迹每车道对总蛋白,她发现是更准确的对管家蛋白GADPH正常化。没有污点凝胶也给她的能力验证实验的每一步。例如,使用没有污点凝胶她能够很快确定,电泳后一步,样本是否存在。她说这一步是必要的因为挑战收集单个细胞的性质。

“我的关键是,如果适当地进行,西方墨点法可以量化,非常可靠,和极有价值的科学在我们的世界里,”墨菲博士说。

这些演讲的录音可以查看或以上Bio-Rad生命科学研究YouTube页面。