应用生物系统公司和根特大学的研究人员证明Megaplex™microrna的分析工具

研究人员根特大学医院在比利时和应用生物系统公司。发表了一项研究证明了新方法的有效性分析小分子核糖核酸的小样本。

茎环结构rt - pcr microrna的表达研究名为“高通量分析使用少量的输入RNA,”描述了450个人类小分子核糖核酸的同时分析样品的单个细胞。这篇论文发表在《华尔街日报》网站上核酸的研究。

这项研究提供了一个新的工作流验证应用生物系统公司开发的microrna的分析,使高度敏感,高通量检测的microrna极其微小的生物样本。

小分子核糖核酸是最近发现的一类非编码小RNA分子受到科学界的关注的重要的作用在调节基因表达和最近的研究暗示这些分子在复杂疾病的过程,如癌症。

microrna的发现以来,有超过800人类microrna已确定,更多的是等待实验验证。为了利用这一重要的潜在的调节基因,科学家们需要高通量和敏感的检测方法能够测量microrna的表达从非常小的生物样本,包括单个细胞。

这项研究的目的是为了测试新工具的能力基于应用生物系统公司的茎环结构,primer-based实时PCR方法和行业标准TaqMan®化学精确识别癌症microrna在三个不同的神经母细胞瘤细胞系,与和没有pre-amplification一步。

在这项研究中,对单细胞水平是通过使用一种新颖的方式将公司的最近的早期访问版本商业化Megaplex™底漆池。

先前的研究已经报道了使用pre-amplification结合茎环结构的过程;但是,没有发表的研究到目前为止已评估的影响pre-amplification一步microrna的表达忠诚的测量。因此,这项研究的主要目标之一是评价pre-amplification是否妥协结果的准确性。

研究人员在这项研究报告公正、高效pre-amplification效率,无论microrna的表达水平,使用这种方法。事实上,pre-amplification启用探测探测不到的microrna在实验中没有pre-amplification,尽管少40倍起始物料的使用。

电影院底漆池由电影院RT引物和电影院前置放大器引物。电影院™RT引物是一组高度多路复用逆转录(RT)引物,大大减少RT反应所需的数量,从而简化了工作流程,减少所需的样本输入创建一个全面的microrna的概要。

Megaplex™前置放大器引物,结合使用TaqMan®前置放大器主混合,使放大的RNA样品开始执行之前使用实时PCR检测,显著提高灵敏度在处理有限的样本。

“高特异性和敏感性的方法使它适合高通量microrna的表达分析,”乔说Vandesompele,根特大学医院的博士,教授。“这部小说技术从应用生物系统公司开辟了分析的miRNAome小细胞群或单个细胞。”

其他技术支持分析多个microrna在一个实验中,但这种方法通常需要大量的输入RNA - 100 ng或更多,因此排除使用非常小的临床活检或一小部分细胞或单个细胞的分析。这限制了研究者的能力进行癌症等疾病的重要实验中常常只分钟收集样本,或源自归档的福尔马林固定石蜡包埋标本的遗传物质可能退化和RNA产量相对较低。

”的能力检测和准确地量化所有已知的microrna从几个细胞甚至单个细胞与这些新工具使研究人员能够进一步深入microrna在生命系统的重要作用,“Caifu Chen说博士科学应用生物系统公司的研究员。“我们预计,研究人员将能够识别新型生物标志物对于复杂的疾病,如癌症,以及更好地了解microrna调节单个神经元或胚胎的发展。”

现在电影院MicroRNA的工具用于本研究应用生物系统公司的商业化使用TaqMan®微阵列和个人TaqMan®MicroRNA化验。在一起,这些工具将简化microrna分析工作流生命科学研究人员和提供全面的报道microrna的表达小生物样品或单个细胞。