单步执行隔离细胞外囊泡的交会

背景
孤立的细胞外囊泡从等离子体是一个挑战由于蛋白质和脂蛋白的存在。囊泡的隔离使用差速离心和密度梯度超速离心法导致co-isolation蛋白质等污染物的总量从脂蛋白和不完整的囊泡的分离,分别。

方法
Platelet-free上层清液,来自血小板浓缩液,加载在琼脂糖CL-2B列执行凝胶排阻色谱(SEC;n = 3)。分数是由纳米粒子跟踪分析,收集和分析脉冲电阻传感、流式细胞仪和透射电子显微镜。高密度脂蛋白胆固醇(HDL)的浓度和蛋白质测定每个分数。

结果
分数9 - 12中最高浓度大于70纳米的粒子和血小板源囊泡(46%±6和61%±2的总数出现在所有收集的分数,分别),但只有不到5%的高密度脂蛋白和不到1%的蛋白质(分别为4.8%±1和0.65%±0.3)。高密度脂蛋白是目前主要在分数18 - 20(总额的32%±2)和蛋白质19 - 21分数(占全国总人口36%±2)。血小板源与原料相比,复苏囊泡为43%±23在分数9 - 12,8倍和70倍浓缩而HDL和蛋白质。

结论
SEC有效地分离出细胞外囊泡的直径大于70海里platelet-free浮在表面的血小板浓缩。应用证交会将改善研究维度,细胞外囊泡的结构和功能特性。

这篇文章,单步孤立的细胞外囊泡凝胶排阻层析法,在线发表在《细胞外囊泡和可以自由访问。