解决艾滋病毒

大约1%的艾滋病患者被称为精英控制者——没有抗病毒治疗能够生存,因为他们的免疫系统产生某些HIV-specific抗体:蛋白质识别病毒的表面特性和绑定,使病毒活性。开发艾滋病疫苗的挑战是确定特定功能的病毒的表面蛋白被免疫系统识别并引起响应类似于在精英控制器。

一种广泛使用的技术研究蛋白质表面的细胞——有时也用于病毒——fluorescence-activated细胞排序(流式细胞仪)。取一个样本的细胞并添加荧光抗体绑定到你感兴趣的表面蛋白。细胞和蛋白质所认可的抗体将成为荧光,而细胞缺乏这样的蛋白质不会。然后您可以分别测量每个细胞的荧光,发送荧光细胞到一个容器中进行进一步的研究,和荧光细胞到另一个。这适用于研究细胞,数以百计的表面蛋白抗体结合,产生很强的荧光信号。流式细胞仪还可用于大型病毒如埃博拉病毒,但研究较少的小病毒表面蛋白——像HIV -流式细胞仪不够敏感。现在EMBL的研究者,ESPCI巴黎,国际艾滋病疫苗倡议已经开发出一种新技术快速排序HIV病毒,这可能导致更多的HIV疫苗的快速发展,他们的研究结果发表在《细胞化学生物学。研究作者Christoph莫顿解释说。

你做什么了?

我们开发了一种系统,使我们能够分析和艾滋病毒的速度每秒数以百计的病毒,分离病毒根据其表面蛋白是否有功能被特定的抗体。而不是使用荧光抗体,直接绑定到病毒蛋白质——生产只有微弱信号——我们把普通,荧光抗体,连接酶碱性磷酸酶(美联社)。然后我们附上单独的病毒滴液体,以及化学物质时行动由美联社。成了荧光抗体与病毒结合蛋白质,和附加的美联社酶产生许多荧光分子仍然在液体滴,创建一个强大的荧光信号。如果该病毒的蛋白质没有正确的特性,美联社的抗体酶不会绑定和不产生荧光。我们可以因此研究单个病毒、排序与高精度根据他们是否显示功能,可以利用在艾滋病毒疫苗的发展。

我们是一个微流体系统——换句话说,它使用技术用于操纵极少量的液体。整个系统包含在微流控芯片的——一个巴掌大小设备组成的微观网络渠道的液体流过。这些渠道的百分之几毫米宽,并且每个液滴在我们的实验是30/1000000000毫升左右。微流控芯片工作时提供特定优势与艾滋病毒等病原体,因为它们完全密封,因此使用非常安全。典型的流式细胞仪系统可以产生飞沫,所以更需要严格的控制措施在处理有害的细菌和病毒。

为什么它重要吗?

我们的方法可以分析和HIV病毒的数量和速度,这在以前是没有的。这使我们能够快速测试数以百万计的病毒变异,这应该大大加快疫苗研发的过程。

在我们的实验中每个液滴包含病毒和抗体,但它也应该可以添加一个细胞液滴和研究抗体是否能阻止病毒进入细胞。用流式细胞仪那是不可能的,所以打开了许多未来的研究机会。

这篇文章被转载材料所提供的EMBL的。注:材料可能是长度和内容的编辑。为进一步的信息,请联系引用源。

参考:

Chaipan C。Pryszlak,。院长,H。Poignard, P。贝奈斯,V。格里菲思,a D。和莫顿,c . a . (2017)。单个病毒滴微流体的大规模筛选中和抗原表位艾滋病毒粒子。细胞化学生物学。doi: 10.1016 / j.chembiol.2017.05.009