技术揭示了信号蛋白质在活细胞的运作

住,现场报告现在可以在活细胞。

合成生物学家从莱斯大学和普林斯顿大学已经证明了“现场记者”技术,可以揭示网络信号蛋白质在活细胞的运作比现有方法更精确。首开先河的报表工具可以显示,例如,信号网络响应速度以及他们的反应如何从细胞到细胞在不同时间和空间。

研究者创造了工具使用不引人注目的蛋白质,捎带上一个重要的信号机制人类细胞用来调节生长,分化、迁移、炎症和其他进程。

在最近的一项研究在开放获取期刊eLife,Rice-Princeton团队展示了其模块化的方法来标记受体酪氨酸激酶(RTK)记者蛋白质激活绿色荧光蛋白质每当RTK伴侣成为磷酸化。

激酶的酶,可以改变其他蛋白质的行为通过附加或分离磷酸基,这一过程被称为磷酸化。rtk专业激酶本身成为磷酸化检测输入信号或刺激时,细胞外,然后调节至关重要的细胞功能。

Rice-Princeton团队显示“活记者”系统可以使用显微镜产生的视频记录活细胞信号网络活动。细胞以及明亮发光,显示的位置和强度信号网络响应,说的吗迦勒Bashor共同通讯作者的研究和生物工程和生物科学助理教授大米。

“大多数时候,当你学习东西的细胞内发生,如信号网络或基因网络,你必须摧毁细胞为了看他们的内容,“Bashor说。“任何时候你可以建立一些细胞生存的地方,你可以观看实时信号网络是如何工作的,细胞的内部,这是一个很大的优势。”

研究者称为记者pYtags参考生物化学命名法中酪氨酸是表示作为“Y”和“pY”当磷酸化。

Bashor和杨小,博士生Bashor研究集团开发pYtags与普林斯顿大学研究小组的合作Jared Toettcher和天蓝色纳尔逊。研究显示系统可以记录rtk的活动称为人类成纤维细胞生长因子受体。

“我们需要一个工程蛋白质的不同系统的一部分——它实际上是免疫信号的一部分——我们把它放到这个新的环境,这是成纤维细胞,杰瑞德与普林斯顿大学在他的实验室里,“Bashor说。“我们认为这可能不是与其他交互的细胞,因为它是一个完全不同的细胞类型。所以,它只是挂在生长因子受体的结束。”

pYtag记者旨在co-activate RTK伙伴和引发的荧光量成比例。所以RTK反应越强,越亮细胞在显微镜下发光。

“这可以接收从生长因子受体磷酸化信号,“Bashor说。“所以,当受体被激活,绿色荧光蛋白,结合膜,得到这看起来像什么在细胞外的绿环。告诉你,实时,当看到的细胞生长因子和多快通路打开。”

Bashor说pYtags可以用来监测许多类型的酪氨酸激酶受体。

“我们展示了本文,笔者可以放在多个不同的生长因子受体类型,这可以作为一个记者,”他说。“这是一个窗口的动态细胞信号,我们真的没有。”

参考:Farahani PE、杨X, Mesev EV,等人pYtags使时空测量活细胞的受体酪氨酸激酶的信号。eLife。2023;12:e82863。doi:10.7554 / eLife.82863

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