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闪烁的星星还是DNA?

这些微小的光点看起来就像天空中闪烁的星星。但实际上,它们是不同的发光DNA分子,在显微镜下结合和解除结合时,它们会忽明忽暗。资料来源:杜克大学沙林·沙阿

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杜克大学(Duke University)开发的一项成像技术,可以通过用发光DNA短链标记细胞内部,同时观察数十种不同分子的活动,这种DNA短链以自己独特的节奏闪烁。

杜克大学电气、计算机工程和计算机科学博士生沙林·沙阿(Shalin Shah)说:“这个想法是,任何事物都有自己的心跳。”“我们把这些时间信号称为‘时间条形码’。”

当将这些条形码附着在细胞或其他物体上并观察足够长的时间后,这些条形码可以用于检测和区分分子尺度上的任何数量的东西——包括隐藏在人体运作和生长所需的数万种蛋白质中的特定蛋白质。

这项技术的原理是利用两条互补DNA链在溶液中碰撞时的短暂相互作用。其中一条链附着在研究人员想要研究的分子上。另一种是自由漂浮的,携带一种荧光染料,当两股纤维结合在一起时就会发光,一旦分开就会变暗。在显微镜下观察一段时间后,绑定和解绑定会产生一种独特的闪烁图案,解码后就像指纹一样。

传统技术使用不同颜色的染料来区分分子,或者使用一种颜色但不同的DNA序列,并分步骤成像,在转移到下一个目标之前将它们从一个目标上洗掉。

沙阿和他的同事说,他们可以做得更好。

该团队与杜克大学计算机科学教授John Reif和橡树岭国家实验室的博士后研究员Abhishek Dubey合作,该团队的方法增加了用单一染料颜色区分不同信号的数量。但是,他们不像以前的单色方法那样依赖于多个DNA序列,而是保持自由浮动链的序列相同,而是调整附着在感兴趣分子上的链上重复序列的长度或数量。这使得它们产生不同频率、持续时间和亮度的闪光。

4月5日,该杂志在线发表了一篇论文ACS合成生物学计算机模拟表明,理论上可以同时区分多达56个不同的分子,每个分子都以相同的颜色闪烁。如果使用多种颜色的染料,这个数字会上升到数千种。研究人员表示,他们的技术也能够以其他方法的一小部分成本做到这一点,而且随着时间的推移,在显微镜的强光下不会褪色。

在3月21日发表在《纳米快报》(Nano Letters)杂志上的一篇配套论文中,该团队也在实验室中测试了他们的方法。Shah和Reif设计了七种不同的DNA装置,将它们连接到玻璃表面,并使用荧光显微镜对它们进行成像。只有不到一个小时的数据,他们就能通过每个设备不同的闪烁行为来区分它们。

沙阿说:“我们的目标是开发一种经济、简单但有效的方法。”“发射的时间强度信号是不同的,可以作为指纹。”

本文已从材料所提供的杜克大学.注:材料的长度和内容可能经过编辑。如需进一步信息,请联系所引用的来源。

参考文献:Shalin Shah, Abhishek K. Dubey, John Reif, 2019。改进的光学多路复用与时间DNA条形码。ACS合成生物学。DOI: 10.1021 / acssynbio.9b00010。

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