看CRISPR-Cas9实时工作
在生物检测CRISPR基因的活动编辑工具用肉眼和紫外线手电筒现在可能利用技术开发的能源部橡树岭国家实验室。
科学家证明了这些实时检测工具在动物、植物和预期使用细菌和真菌与多样化应用生物技术、生物安全、生物能源和农业。这个团队描述的紫外线系统的成功开发园艺研究和他们的理论水平示范在ACS合成生物学。
CRISPR技术迅速成为生物工程的主要工具,和新版本不断在发展。确定是否一个生物体被CRISPR修改技术以前一个复杂和耗时的过程。
“在此之前,告诉如果基因组工程发生的唯一方法是做一个法医分析,”保罗说亚伯拉罕,分析化学家和ORNL的安全生态系统工程和设计科学的焦点区域。“要想成功,你需要知道基因组重写之前的样子。我们想设计一个平台,我们可以主动观察CRISPR活动。”
研究小组开发出一种高效self-detect CRISPR运作方式的解决方案,利用触发技术揭示本身。在正常情况下,CRISPR作品结合短RNA序列,称为导RNA,因为它导致CRISPR匹配的DNA序列。当目标发现DNA, CRISPR修改DNA像小分子剪刀削减通过一个或两个DNA链,根据CRISPR技术使用的类型。
亚伯拉罕把他们的方法比作警报系统有两个组件:一个生物传感器指南RNA重定向CRISPR活动和记者蛋白质旗帜的活动。研究人员对两个组件到有机体的DNA编码使监测系统。
self-detect系统,生物传感器引导RNA CRISPR拦截,防止CRISPR联系原来的基因目标和重定向CRISPR特定DNA序列编码的阴道将绿色荧光蛋白,或GFP。CRISPR编辑序列时,它翻转开关功能产生GFP,创建一个绿色发光信号CRISPR的存在。
因为显微镜才能看到绿色荧光蛋白的发光,研究者们改进了原来的方法,用类似的替代GFP记者蛋白质,称为eYGFPuv,可见在紫外线的类型通常被称为一个黑色的光。
参考:元G,哈桑MdM,姚明T, et al。植物性生物传感器检测CRISPR-mediated基因组工程。ACS Synth杂志。2021年。doi:10.1021 / acssynbio.1c00455。
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