一个新的双荧光素酶检测使用NanoLuc®允许第二代巧合记者系统减少在高温超导海报产生错误的结果

Luciferase-based报告基因分析仍然是一个基石的大规模筛选化合物由于其高灵敏度和动态范围。然而,可以生成大量的无关的冲击由于直接相互作用的化合物荧光素酶的记者。来帮助区分化合物调节感兴趣的生物通路的影响记者酶的稳定性或活动,我们已经开发出一种第二代巧合记者系统转录激活导致化学计量的表达两个同源的记者有不同的配置文件的复合干扰。在此系统中,萤火虫荧光素酶(美国人)和PEST-destabilized NanoLuc®荧光素酶(NlucP)表达了同样的推广使用核糖体跳过P2A肽介导的。

敏感测量美国和NanoLuc (Nluc)在相同的示例中,我们已经开发出Nano-Glo®Dual-Luciferase®记者(NanoDLR™)试验系统,均匀溶解性试验中执行一个“add-read-add-read”格式,美国人的信号是淬火数百万倍Nluc试剂的加成。Nluc亮度的增加和改善美国抑制意味着Nluc可以检测到超过2 - 3数量级的摩尔浓度低于Renilla现有同质萤火虫荧光素酶/ Renilla dual-luciferase化验(Dual-Glo),允许两个荧光素酶活力的记者。单副本后整合Fluc-2A-NlucP biocircuit基因位点与帕金森病有关,高温超导化合物影响使用NanoDLR易于辨别影响转录的记者之一,收益率下降> 5倍的数量。