p27的蛋白质组学分析^kip1绑定在转录调控蛋白质揭示了一个假定的角色通过RNA聚合酶II的互动

介绍和目标:蛋白p27 (kip1)属于Cip-Kip细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)抑制剂的家庭。除了这个角色,p27还能充当转录监管机构。它直接与梦的p130 / E2F4单元转录抑制因子通过其羧基一部分复杂。进一步确定新的转录调控机制由p27我们旨在识别核蛋白质与其羧基末端域相关联。

方法:p27肽亲和色谱法列(包括同上,161 - 198年)绑定到sepharose-beads被用来净化p27-binding蛋白质(p27-BPs)。这些蛋白质质谱分析(MS)随后被确认。

结果与讨论:分析纯化p27-BPs小姐透露,8子单元的RNA聚合酶II (RNA聚合酶II)和p27交往。
p27的交互与RNA聚合酶II是由免疫沉淀反应验证使用anti-p27抗体(IP)分析。
随后Proto-Array分析确定了RNA聚合酶II-K亚基p27的直接目标。这种直接交互验证通过亲和色谱法纯化蛋白质。
最后,通过Chromatin-IP(芯片),我们可以建立一个联系的RNA聚合酶II加载特定靶基因的启动子和p27在这些启动子的存在。
结论:蛋白p27^Kip1可能加载调节转录的RNA聚合酶II特定靶基因的启动子。