抗血管生成效应的评估在Clonetics VEGFR2 siRNA™HUVEC使用Lonza 4 d-nucleofector™系统

大多数癌症的血管生成是一个标志,因此治疗癌症的一个有吸引力的目标。最简单的筛选和目标验证抗血管新生的策略目标识别涉及击倒目标在人类脐静脉内皮细胞(HUVEC)和评估后续影响管形成康宁的基底膜基质™产品。

使用小核RNA)是可拆卸的RNA的策略之一,从而细胞内蛋白表达。核细胞内可以交付使用化学转染或electroporation-based策略等提供的一个Lonza Nucleofector™技术。
在当前的研究中,我们使用了Lonza 4 d-nucleofector™x单位转染捐助国Clonetics™HUVEC培养在™2内皮细胞生长媒体。细胞转染核针对血管内皮生长因子受体2 (VEGFR2)。转染条件调整使用pmaxGFP™矢量,这是表明Nucleofection过程没有对HUVEC的管形成的潜在有害影响康宁的基底膜基质™产品。

有效的降低VEGFR2证明VEGFR2-siRNA转染后的蛋白质含量。最好降低24小时后观察转染效率。VEGFR2-siRNA转染细胞表现出显著的抑制管形成康宁的生长因子减少人工基底膜™产品相比,控制样品。有效降低以来VEGFR2蛋白质Clonetics™HUVEC使用Nucleofector™技术可以在时间点早在转染后24小时,这是一个有效的方法进行目标识别,验证和筛选siRNA基础抗血管生成疗法的癌症治疗。