用自动活细胞成像描述GPCR激活

G蛋白偶联受体(GPCR)介导的通路是细胞对细胞间和环境信号作出反应的关键，也是药物发现工作的主要焦点，特别是在癌症治疗方面。激活GPCRs的分子，以及相关G蛋白触发的信号级联，是多种多样的。荧光染料和生物传感器可用于监测第二信使水平的变化，包括Ca2+和循环AMP (cAMP)，以响应GPCR激活。在这里，我们描述了一种基于活细胞成像的方法，使用Lionheart™FX自动活细胞成像仪和Gen5™Microplate Reader和成像仪软件检测GPCR激活。与依靠总荧光强度测量的方法相比，该方法提供了一个大的检测窗口和改进的灵敏度。双直列分配尖端能够添加GPCR激动剂，并持续监测细胞反应。此外，高达每秒20帧的图像捕获速率能够表征快速GPCR动力学。