决心在RNAi Interferon-Pathway-Related基因的诱导

实验方法使用短核RNA)分子特别沉默基因表达已经成为近年来广泛应用。对于所有在分子和细胞生物学技术,协议优化的重要性和使用适当的控制不能被高估了。

虽然interferon-pathway-related的诱导刺激过程期间RNAi通常归因于长,双链核酸,它也可以是短的担忧在转染核分子或其他RNAi-related实验。

许多参数,包括核化学、转染试剂、细胞培养条件,核浓度有可能导致interferon-pathway-related反应。这些反应可能干扰造成的特定生物效应siRNA-mediated击倒的感兴趣的基因,造成误导的结果。

这里描述的分析量化的mrna interferon-pathway-related特征源于诱导转录的基因,使用定量、实时rt - pcr。

STAT1的化验是特定,白细胞介素6、IFNa1, IFNß1,IFIT1, IFITM1, OAS1或OAS2。我们进行了分析与功能的细胞转染后合成siRNAs或polyinosinic-polycytidylic酸(聚(I)聚(C)),这是一个长,双链RNA诱导干扰素通路。虽然保利(我)聚(C)转染造成戏剧性的几个干扰素通路基因的诱导这些细胞,等化验表明,诱导时未见siRNAs试剂盒的转染。

我们得出结论,这些分析是有价值的工具,优化实验条件和使用控制,确保成功的RNAi实验。