二次重编程期间非干扰计数和定量荧光iPS菌落:每6孔板7分钟，双荧光全孔成像细胞术

目前用于检测诱导多能干细胞(iPS)重编程的方法要么是破坏性的，如流式细胞术(FC)，要么是低通量的，如荧光显微镜(FM)。使用Celigo S成像细胞仪和二次iPS重编程，我们开发了一种结合流式细胞仪和荧光显微镜优点的方法。该方法基于荧光鉴定表达Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc四个重编程因子的iPS菌落，通过ires后四个因子的mOrange表达，并通过荧光检测这些菌落中的多能性报告细胞Nanog-GFP+的重编程过程。该方法不仅可用于重编程动力学，还可用于考察外部因素对重编程的影响，为研究重编程的分子机制提供了有力的工具。

Nexcelom公司的Celigo S成像细胞仪已被应用于iPS重编程的自动化、快速评估。Celigo使用f-theta光学，使用亮场和/或荧光照明提供高质量的全井图像。自动分割和分析提供了基于mOrange和GFP荧光群体检测的iPS重编程的定量输出。