FDSS7000EX的光遗传学:使用动态平板阅读器表达通道视紫红质的培养细胞的光刺激膜去极化

通道视紫红质(ChR)是莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtti)中的一种藻类蛋白，是一种光激活的阳离子通道，可诱导膜去极化，在可兴奋细胞中表达时可触发动作电位。这种光遗传学工具与基于荧光的高通量筛选(HTS)分析的耦合预计将在神经和心血管药物的发现和开发中发挥重要作用。在本研究中，我们将蓝光刺激能力纳入FDSS 7000EX动态平板阅读器，建立光基因膜电位染料检测系统。

我们开发了稳定表达ChR2WR(通道视紫红质1和2的嵌合蛋白;ChR2WR)和ChR2WR具有人电压依赖性钠通道(NaV1.5)和人内向整流钾通道(KCNJ2)。

我们使用FDSS 7000EX动态平板阅读器进行的光基因膜电位染料分析显示，由光(480 nm)诱导的ChR2WR激活引发的去极化导致利多因敏感膜去极化。此外，FDSS 7000EX平板阅读器还捕捉到了对20种重复光刺激的反应，这表明它适用于使用依赖性药物筛选。我们的报告表明，使用FDSS 7000EX动态平板阅读器与光遗传学结合时的荧光测量是一种有用的工具。