三维球面分析在HTS药物发现方法中的进展

药物发现研究中抑制癌细胞增殖的研究还没有很好地从传统的二维(2D)体外实验转化为体内研究。大多数抗癌药物化合物的研究都是在经过组织培养处理的2D实验中进行的，目的是研究增殖、活力和凋亡。越来越多的科学证据表明，以三维(3D)球体的形式生长的癌细胞比2D细胞培养形式更能预测体内研究结果。通常，球体是通过各种方法生成的，如u型底板、悬滴或半固体介质，球体生长的分析是使用显微镜进行的，这是耗时、费力、低通量和缺乏再现性的。此前有文献报道使用自动成像仪在96孔板中监测3D球体的大小和生长(1)，其中球体在4天内从固定数量的细胞形成，并返回一致的球体大小。本研究重点使用384孔低附着u型底板结合Celigo®成像细胞仪成像并分析3D球体的形成。与96孔板相比，这可以提高产量、重复次数和每个板的参数。U87MG细胞在384孔板中形成肿瘤球，随后通过成像进行分析。数据表明，在384孔板中可以形成可重复的三维球体。荧光活力研究进行与成像仪使用像素强度分析。 Moreover, the assay was validated for drug screen using various drug compounds that have shown antiproliferative effects. Together, these data demonstrate that the tumorsphere formation assay can be developed, validated and used for high-throughput anticancer compound screening in 384-well U-bottom low attachment plates using the Celigo Imaging Cytometer.