量化的自然杀伤细胞介导Cytotixicity使用Celigo成像血细胞计数

细胞毒性检测中发挥核心作用在研究免疫效应细胞的功能如cytolyticT淋巴细胞(CTL)和自然杀伤(NK)细胞。传统上,细胞毒性检测执行使用51铬(51 cr)和钙黄绿素释放化验。分析涉及标记肿瘤细胞(目标)和放射性同位素或荧光染料,当目标细胞受到ctl细胞溶解或NK细胞(效应),他们释放裹入标签进入媒体消散。标签的数量在媒体上测量来确定水平的细胞毒性效应物诱导。这些传统的方法可能会产生不一致的结果由于低敏感性造成的可怜的加载效率和高自发释放的试剂。在这个工作中,我们将演示一种新的细胞毒性试验使用Celigo成像血细胞计数方法。利用成像血细胞计数,生活的直接细胞计数荧光目标cellscan被执行,这是一个直接的细胞毒性的评估方法。人类NK细胞从一个健康的捐赠者被用作效应器,和K562(悬架)和IMR32(附着)作为靶细胞。targetcells都首先沾钙黄绿素点,播种在标准的96 - 10000细胞/微型板块。捐献者NK cellswere然后添加到每个在Effector-to-Target (E: T)比例10:1,5:1,2.5:1、1.25:1、0.625:1、0.3125:1。 The 96 well plate was then scanned and analyzed using Celigo imaging cytometer at t = 1, 2, 3, and 4 h to measure the % lysis of target cells. The results showed increasing % lysis as incubation time and E:T ratio increased. The proposed Celigo imaging cytometry is an accurate and simple method for direct quantification of cytotoxicity, which can be an attractive method for both academic and clinical research.