快速解决方案交流与Ligand-Gated通道研究7000年PatchXpress自动膜片钳系统

文摘

7000的PatchXpress®膜片钳系统是一个自动化的电生理学研究工作站,允许用户增加吞吐量质量记录和测量离子通道活动从几乎任何通道类型。独特的SealChip™平面电极英杰华生物科学和PatchXpress流体系统支持高质量的电压门控离子通道和ligand-gated的膜片钳记录。

系统使用一个机器人吸量器提供配体和药物直接修补细胞全细胞配置。配体的冲刷每一对是通过使用一个专门的灌注方法接近录音对快速流体交换的基础附近的细胞。

为了量化配体和药物的速度,我们研究了流体汇率7000年PatchXpress系统利用这项细胞endogenously-expressing inward-rectifier K通道和改变外部钾(K +)的浓度。从低到高(K +)与一个指数增加当前时间进程和一个时间常数的19±11女士。洗出高(K +)与独立清洗站的时间常数为420±281 ms。

我们进一步测试系统与细胞表达ligand-gated渠道,包括HEK细胞内生表达时pH-sensitive ASIC渠道以及L-tk细胞heterologously-expressing GABAA受体。一系列的配体已经成功测试了在两个细胞/通道类型。配体之间的相互作用和特定的受体激动剂和拮抗剂渠道被记录。

完整的冲刷的配体(GABA)很容易获得独立的清洗站。我们的研究结果表明,流体输送系统的属性和新添加的软件精确计时的功能配体和药物输送,使PatchXpress 7000平台适用于各种ligand-gated离子通道研究。