通用均相生物荧光法在体外监测各种甲基转移酶的活性

蛋白质和核酸的转录后修饰被公认为在许多细胞过程中起着重要作用。最近的生化和生物学数据表明，参与这些修饰的酶，包括磷酸化、乙酰化、甲基化等，在癌症、炎症和神经退行性疾病中发挥致病作用。因此，通过小分子对这些酶进行药理调节将有利于开发新型疗法，以满足多种未满足的医疗需求。其中，已知甲基转移酶通过改变核酸或蛋白质的甲基化状态来改变表观基因组，从而导致细胞功能的改变。为了筛选这些酶的调节剂，以开发下一代药物，迫切需要稳健的筛选试验。我们开发了一种新的检测方法，可以监测甲基转移酶的活性及其由小分子调节的情况。

该方法是通用的，因为它是基于s -腺苷同型半胱氨酸(SAH)的定量，SAH是大多数甲基化反应的产物，因此可用于广泛的甲基转移酶，如DNA、蛋白质、RNA和小分子甲基转移酶。生物发光检测是相当敏感的，并格式化为高温超导应用。此外，该方法已被验证用于所有类型的蛋白质甲基转移酶(赖氨酸和精氨酸)，以及不同类型的底物(小肽，大蛋白质，甚至核小体)。该方法的一个重要特点是其适用于广泛的底物，不限制其浓度或组成(短肽与长肽)，因此能够生成动力学数据并确定感兴趣的甲基转移酶的各种调节剂的作用机制。