三维人体肝脏Microtissue模型的验证长期肝毒性的研究

多个体外动物模型被用来确定行动的不同机制(农业部)观察肝毒性。研究使用鼠肝线粒体和新鲜分离大鼠肝细胞表明二苯胺,常见的非甾体抗炎药结构,非耦合氧化磷酸化,减少肝脏ATP含量(Masubuchi et al ., 2000)。线粒体通透性转换(MPT)也被证明是重要的diclofenac-induced肝损伤,以及氧化应激的作用在MPT感应(Gomez-Lechon et al ., 2003)。最后,根据施密茨工作et al ., 1992年,细胞色素P450 (CYP) -相关代谢活化的药物,和活性代谢产物的形成也与双氯芬酸肝毒性有关。

这些机制的结合的肝毒性作用通常发生在开始几周的治疗。这强调这样一个事实:体外安全测试应该包含定量实验,分析潜在的药物的影响时期接触到7 - 14天或更长时间。然而,主肝细胞培养将二维(2 d)的方式在一个微型板块的底部,体外肝毒性测试的标准实践,已证明进行快速分化功能和代谢能力的损失(Cheng et al ., 2008),和减少复杂的inter-cellular和cell-matrix相比,体内的相互作用。所需要的是一个细胞培养模型,细胞保留长期生存能力和功能,通过创建一个良好的环境对这些改革的交互。

我们评估3 d人体肝脏microtissues是否适合用于长期毒性研究。主要人类肝细胞reaggregated到功能性microtissues悬滴技术。microtissues证明体内cellcell和cell-matrix交互和保留生存数周。化验小组运行评估细胞健康和不同的恐鸟表现出使用3 d肝脏microtissues双氯芬酸,除了原发性肝细胞培养在2 d。量化的各种发光和荧光排放通过微型板块阅读和成像进行了小说细胞成像多模读者。