功能细胞内源性GPCRs使用xCELLigence系统的剖析

有~ 800预测该类的成员在人类基因组中,参与不同的信号通路在一系列广泛的细胞和组织类型。GPCR的调制函数已经被证明在多种疾病的治疗中获益免疫学、神经学、心脏病和癌症。

罗氏应用科学(六:罗依,罗格;写明ATCC研究实时OTCQX:股市)与内源性GPCR函数使用xCELLigence系统来自写明ATCC罗氏公司和细胞。包含微电极细胞被播种到盘子,允许精确测量细胞骨架结构的细微变化和细胞收缩引起GPCR激活不使用外源性标签。GPCRs由绑定传输细胞外信号耦合的鸟嘌呤nucleotide-binding蛋白质,或G蛋白在细胞质中。主要的第二信使途径耦合到包括环腺苷酸/蛋白激酶G蛋白质,钙/磷脂酶C, beta-arrestin / MAPK和ρ家庭gtpase,所有这些会导致形态变化很容易检测到细胞阻抗录音。

与传统使用工程细胞系的化验,形态impedance-based测量可以捕获多个信号通路的聚合效应。分析的优势内生GPCR函数包括评估目标受体的正常表达水平;自然交互的分析受体与监管合作伙伴包括人类——或者形成;和允许本机耦合细胞内G蛋白。使用label-free分析系统也大大降低试剂成本,因为一个化验可以测量所有的第二信使给定GPCR激活途径。Impedance-based实时动态录音可以检测所有GPCR反应过程中实验。

在最近的一项研究(1),xCELLigence系统被证明是一个敏感的和健壮的试验持续测量内生GPCR的功能。控制GPCR受体激动剂生产大形态反应灵敏度高(IC50值测定)和优秀的鲁棒性(通过Z因子测定)。一组43 24治疗相关受体配体包括家庭检查。常用功能GPCR概要文件创建和治疗相关的细胞系,海拉,u - 2侦察机OS, SH-SY5Y和CHO-K1(写明ATCC CCL-2、htb - 96, ccl crl - 2266和- 61),以及两个主要类型的细胞,人体血管内皮细胞(写明ATCC pc - 100 - 010)和混合主要肾上皮细胞(ATC C pc - 400 - 012)。