IDT启动CRISPR的新方法

集成DNA技术(IDT)引入了一个新方法CRISPR-its创新Alt-R™CRISPR-Cas9系统,基于天然链球菌CRISPR RNA系统。的Alt-R CRISPR-Cas9系统大大提高了基因组编辑力量由于research-optimized crRNAs (CRISPR RNA)和tracrRNAs (trans-activating crRNA)。改进的效力和安全性,系统通过提供简单,节省时间随时可用的RNA也减少细胞毒性的试剂避免激活细胞的先天免疫反应。

CRISPR / Cas9系统已成为一个主要的工具修改从大肠杆菌生物到人类的基因组。嵌合single-guide RNA (sgRNAs由crRNAs之间的融合和tracrRNAs)通常克隆到质粒载体,然后用来表达细胞的RNA触发。

然而,质粒载体的使用推动基因组编辑缺乏有效性和涉嫌造成重大的脱靶效应,虽然sgRNAs通过体外转录可以是昂贵的,通过激活先天免疫系统的细胞毒性在许多哺乳动物细胞。制造高质量的sgRNAs也由化学合成困难和昂贵的由于他们的长度。

sgRNA-based系统的解决问题,踊跃参与进行了广泛的研究,优化本机链球菌细菌系统,它使用2节crRNA: tracrRNA复杂直接Cas9乳沟。

踊跃参与研究人员发现,不仅可以缩短crRNA和tracrRNAs分别36和67个核苷酸,但这样做增加了目标效能的反应与其他方法相比。

缩短这些RNA使IDT生产组件的高品质、合成RNA寡核苷酸,引起细胞毒性和先天免疫反应的激活。研究人员也可以受益于一个安全、快速和简单的协议没有病毒粒子制备,体外转录,或纯化步骤。

马克Behlke博士,踊跃参与评论的方案;“我们非常兴奋我们新的Alt-R CRISPR-Cas9产品范围。对我们来说这是逻辑重新考虑自然系统,自然是通常很擅长设计高效solutions-sometimes熟练的推动的需要在正确的方向上。在这个领域我们的研究发现,缩短自然crRNAs和tracrRNAs在一个意想不到的结果,然而,显著改善当前CRISPR方法。不仅是编辑效率提高,但较短的合成rna更容易用高质量、高通量的制造方法。这个由两部分组成的RNA系统也非常干净操作特别有用的细胞,它不留下足迹,可能导致基因组不受欢迎的改变,系统可以像DNA-directed表达式。我们认为这个系统不仅显示了巨大的希望让CRISPR更加便利和有效地在治疗应用研究也正是出于这个原因。”

研究人员可以找到更多关于创新的新系统的网络研讨会题为“提高效率的基因组编辑Alt-R™CRISPR-Cas9系统:设计和使用“周三,2015年11月4日。Garrett Rettig博士研究科学家在分子遗传学IDT领导研究工作在CRISPR基因组编辑方法将网络研讨会中央标准时间早上9点到下午1点。

表示之前从最近的“新RNA工具优化CRISPR / Cas-9基因组编辑”研讨会,提出详细的研究开发Alt-R CRISPR-Cas9系统。新的网络研讨会将功能详细看看系统的组件,解释如何设计和秩序Alt-R CRISPR crRNAs,并提供一个逐步指南实验过程。