Izon Science使用Gen 2 qEV色谱柱和定制的专有树脂提高EV纯度

Izon科学已宣布推出第2代，qEV色谱柱的增强范围，用于尺寸排除色谱分离。新的qEV柱系列由专有的琼脂糖树脂制成，可提供更纯化的细胞外囊泡(EV)含洗脱液。第2代qEV色谱柱的发布符合支持快速增长的电动汽车研究和应用领域的需求，其中样品纯度对下游结果有巨大影响。

去除比以前更多的蛋白质

第2代色谱柱中使用的专有树脂可以从装载的样品中去除更大比例的蛋白质，如图1所示:



图1。用Izon的自动分数收集器分离的人血浆样本中存在的蛋白质(2 mL)，显示为总负载蛋白质的百分比。采用双辛酸法测定蛋白质含量。70 nm系列和35 nm系列的qEVoriginal Legacy列和Gen 2 qEVoriginal列的数据(0.5 mL加载容量)。

增加ev -蛋白质比例

Gen 2柱样品纯度的提高也可以通过比较ev -蛋白比来证明。EVs的数量是通过Exoid获得的，Exoid是Izon公司的可调谐电阻脉冲传感(TRPS)纳米颗粒测量系统，该系统可以在颗粒的基础上进行分析。图2显示了Legacy列与Gen 2列的分离功能:



图2。每微克蛋白质的细胞外囊泡(ev)的数量，分别通过可调谐电阻脉冲传感和双胞二酸测定来测量。数据显示了使用Izon的自动分数收集器(AFC)和qEVoriginal色谱柱(0.5 mL加载体积)在70 nm和35 nm系列中分离的人血浆样本。

Gen 2柱的增强分离提供了更多纯化的ev含样品，这是下游分析和功能研究非常需要的。

调整样品组成以适应您的下游分析

在纯化的收集量(pcv)中，增加纯度还有另一个主要好处。改进后的分离在决定使用哪些pcv时提供了新的控制级别。如下图所示，选择不同的pcv可以影响池化卷的组成:

图3。A)使用Gen 2 qEVoriginal/35 nm色谱柱和自动馏分收集器(AFC)分离的人血浆样品的洗脱剖面。在Exoid上测定颗粒数，用双辛酸法测定蛋白质含量。褪色的条形图表示基于不同池化体积的计算和比较估计的细胞外囊泡(EV)浓度;过多的蛋白质水平阻碍了TRPS分析。不同的纯化收集体积(pcv)可以汇集以优化样品，这取决于下游使用的应用程序或分析方法。不同的pcv可以合并为优先级B) EV浓度，C) EV回收率或D) EV纯度。E)推荐的默认设置优先考虑EV回收和纯度的平衡。用户手册提供了何时以及如何调整AFC设置需要相应的指导。

Gen 2 qEVoriginal/70 nm色谱柱的进一步优势

在色谱柱优化之后，一个额外的好处变得显而易见:与传统色谱柱(Legacy qEVoriginal/70 nm)相比，第2代qEVoriginal/70 nm色谱柱提供了更高的ev浓度。



图4。与使用自动分数收集器收集的Gen 2 qEVoriginal/70 nm色谱柱(2 mL池容量)相比，在Legacy qEVoriginal/70 nm色谱柱上分离的人血浆样品(0.5 mL负载容量)中每mL细胞外囊泡(ev)的数量。EV浓度通过Exoid获得，Exoid是Izon公司的可调谐电阻脉冲传感(TRPS)纳米颗粒测量系统，该系统可以逐个颗粒进行分析。

一个新的柱优化为1ml的样品加载体积

第一个被释放的第2代列是qEVoriginal Gen 2，和qEV1 -一个为1毫升装载量优化的列。目前已有35纳米和70纳米系列可供选择，其最佳回收范围分别为35-350纳米和70-1000纳米。qEV1对于许多研究低样本量的研究人员来说是一个有价值的补充，特别是那些对EV-RNA和生物标志物的发现和开发感兴趣的研究人员。

qEV隔离平台的发展

自2014年首次推出qEVoriginal以来，现有的Legacy色谱柱范围已经扩大，以适应不同的样品加载量，包括qEVsingle (2016)， qEV2和qEV10(2018)以及qEV100(2019)。qEV柱已用于研究不同类型的样本，包括血浆、细胞培养上清、脑脊液和支气管肺泡灌洗液。2019年自动分数收集器(AFC)的引入标志着从劳动密集型的手工收集到快速和可重复的方法的重大转变，可以扩大规模进行大规模生物标志物研究。第2代专栏的发布反映了Izon致力于为电动汽车应用(包括电动汽车诊断)提供可扩展的前进方式。