Promega NanoLuc使第一测量药物在活细胞
发表在《自然通讯,Promega科学家开发出了一种NanoLuc-based用于药物发现方法,措施目标住宅为目标的一个关键方面参与活细胞。技术使用生物荧光共振能量转移(BRET),并允许测量药物绑定目标实时和活细胞内蛋白质。
直接测量目标订婚
测量目标protein-drug入住率在细胞和关联这一目标与预期的药理作用在药物发现中很重要。NanoBRET™技术提供了一个简单的方法来直接参与评估目标。“NanoBRET系统允许我测量接触化学抑制剂直接向我们的目标的活细胞,我兴奋的将此技术应用于其他目标,”沃克格雷姆说,团队领导,细胞药理学药物发现单位英国癌症研究曼彻斯特理工学院。
测量目标在活细胞
NanoBRET技术的一个更大的好处是能够测量目标停留时间,药物相互作用的持续时间。它允许研究人员优化药物增强行动尽管从系统中清除。沃克补充道,“[NanoBRET技术]提供了一个简单的方法来测量复合停留时间在目标细胞同时保持完好无损。此功能允许我们的项目团队阐明小说对我们的化学探针的作用机制。”
NanoBRET目标订婚是如何运作的吗
检测药物相互作用,NanoBRET目标接触使用cell-permeable荧光示踪剂设计与NanoLuc-tagged目标蛋白质。相互作用的结果是能量传递的NanoLuc蛋白质示踪,生成一个可测量的信号。如果一个候选小分子药物与靶蛋白的相互作用,示踪剂和药物绑定和BRET信号减少竞争。停留时间测量依靠pre-equilibration化合物的细胞,去除多余的化合物,并添加示踪剂。实时监测信号显示与慢速目标化合物分离阻碍示踪绑定和缓慢的BRET信号生产。
额外的出版在《自然方法——“应用BRET监控配体结合GPCRs”细节NanoBRET技术的应用。本文特性研究的细胞表面蛋白的受体(GPCRs),一个重要的目标类药物。
NanoBRET目标参与技术的更多信息,访问以下进一步信息链接。
