同时监测蛋白质滴度和糖基化
细胞系发育通常包括筛选数千个克隆,以努力找到少数稳定的,生长如预期的,并产生高产量的产物。从设计最佳细胞系到生产目标生物制剂所需的时间可能是令人望而却步的,并且可能因分子而异。虽然像效价筛选这样的表达水平分析是在早期进行的,但其他关键质量属性(cqa),如聚糖表征,由于缺乏可用于快速筛选的适当和高通量分析技术,通常只在开发过程的后期进行评估。
常用的抗体定量方法需要专业仪器和技术人员(HPLC)或耗时(ELISA)。相比之下,Octet®BLI平台使用生物层干涉测量法(BLI)来检测分子的实时结合,作为量化或动力学分析的手段。这种无标签技术基本上消除了除可选稀释步骤之外的任何样品制备。BLI仅测量生物传感器化学捕获的东西,使其在测量复杂基质时具有特异性,如粗上清液。高通量Octet®模型可以同时处理多达96个样品。
Sartorius Octet®Gly S和GlyM试剂盒旨在为细胞系开发科学家和上游生物加工的科学家提供随时可用的试剂盒,用于快速筛选纯化和细胞收获抗体样本的%甘露糖含量或相对唾液酸水平。该结果与HPLC和质谱技术在样品排序方面具有良好的相关性,并且在开发过程早期使用的分析不需要在样品分析之前进行样品纯化或酶解。
结合使用相同样品进行滴度测定,可在不到10小时内筛选多达1000个克隆。当结合Octet®仪器的高通量特性和使用各种现成生物传感器进行样品分析的灵活性时;包括效价测定、靶抗原结合的特异性和脱靶率分析(均来自同一样本集);它是评估关键质量属性(cqa)的附加工具,应该有助于在细胞系发育过程中早期选择最优克隆,防止后期失败将更高质量的候选转移到下游。