CRISPR和基因组编辑——多媒体

本研究关注效率和细胞毒性的比较五种最受欢迎的转染试剂:Lipofectamine 2000年Lipofectamine RNAi马克斯(表达载体),Dharmafect (Dharmacon) HyperFect(试剂盒)和Interferin (PolyTransfection)。在这项研究中,我们观察到,除了Lipofectamine RNAi马克斯,其他试剂相对较高的细胞毒性和在MCF-7和海拉细胞转染效率低。

本项目主要针对绕过困难和缺点的古典同源重组产生与定制基因改变动物模型,通过开发替代小说和有前途的方法semi-high吞吐量体内基因定位或基因沉默。我们优化的程序构造设计、转染基因传递和基因分型。我们正在评估这些新策略来研究基因参与血管生成。

使用短核RNA)基因表达的降价已经成为一个强大的工具在分子和细胞生物学。某些应用程序需要使用小干扰rna浓度低(少于5 nM),例如,减少非特异性效应的可能性。我们从实验中显示数据使用一个新的转染试剂,HiPerFect转染试剂,它允许高效的基因与小于5纳米siRNA击倒。

实验方法使用短核RNA)分子特别沉默基因表达已经成为近年来广泛应用。对于所有在分子和细胞生物学技术,协议优化的重要性和使用适当的控制不能被高估了。

在这项研究中,siRNA-mediated RNAi已经结合全基因组表达谱使用高密度寡核苷酸探针阵列。这种技术的结合提供了大量的信息,并允许优化RNAi实验通过监测小干扰rna转染的影响在每个基因的基因组。CDC2有效地撞倒了使用核设计的试剂盒。击倒后,表达式分析了使用Affymetrix®GeneChip®数组。

我们已经开发出一种高通量表达式包含hexahistidine亲和标记的重组蛋白在大肠杆菌在倪一步亲和纯化的蛋白质^{2 +}琼脂糖珠。