一项测量t细胞对SARS-CoV-2免疫力的皮肤试验

了解个人对SARS-CoV-2的免疫水平可提供有用的信息，可用于支持大流行期间的患者护理、公共卫生监测和疫苗试验。迄今为止，检测免疫的方法主要是使用血清学检测抗体。然而，为了克服与这种方法相关的一些限制，人们对开发和使用可以测量细胞介导免疫的测试越来越感兴趣。

188金宝搏备用最近有幸与Seth Lederman进行了交谈，他是公司的总裁兼首席执行官Tonix制药以了解更多关于T细胞对SARS-CoV-2的反应，它与抗体反应的比较，以及在大流行期间测量它的重要性。在这次采访中，Seth还谈到了TNX-2100，这是一种皮肤测试，旨在评估和测量T细胞对SARS-CoV-2的免疫反应。

安娜·麦克唐纳(上午):到目前为止，我们对SARS-CoV-2的免疫反应有什么了解?

塞斯·莱德曼(SL):自大流行开始以来，我们已经了解到关于SARS-CoV-2免疫反应的两条关键信息。首先，大多数从COVID-19康复的人如果再次感染，都有保护措施，不会发展成严重病例。第二，我们还知道，大多数接种疫苗的人都能免受COVID-19严重病例的侵害。到目前为止，通过接种疫苗预防严重COVID-19似乎与预防自然感染类似。

然而，有三个重要的信息我们仍然不知道。首先，谁是罕见的“疫苗失败者”，即接种了疫苗但仍易感染的人?第二，哪些人从COVID-19中康复，但仍然容易再次感染COVID-19 ?第三，成功接种疫苗或在自然COVID-19后产生免疫力的人的免疫力能持续多久?

问:T细胞免疫和抗体免疫是如何比较的?为什么T细胞反应如此重要?

SL:对特定病原体的免疫由T细胞和抗体介导。T细胞在对抗病毒中起着主要作用。抗体在对抗细菌时起主导作用，但在对抗病毒时也起辅助作用。病毒特异性T细胞寻找体内被病毒感染的细胞并杀死它们。重要的是，T细胞可以在感染细胞成为病毒工厂之前杀死它们。在这个过程中，T细胞在清除体内病原体方面发挥着重要作用。T细胞免疫持续数年甚至数十年。T细胞的主要挑战是病毒特异性T细胞很难在实验室测试中测量。虽然抗体在防御病毒方面只起辅助作用，但在血液测试中更容易测量。幸运的是，抗病毒抗体的存在是T细胞对病毒免疫的替代标记。 Unfortunately, antibody responses are transient and typically disappear six to nine months after infection.

监测对SARS-CoV-2的T细胞免疫对于确定某人是否成功接种了疫苗或在从COVID-19恢复后产生了免疫可能很重要，原因有两个。首先，T细胞反应主要参与对抗和清除病毒，而抗体反应主要是一种替代标记。第二，T细胞反应比抗体反应持续的时间长，所以只有T细胞才能显示某人在测量前一年是否暴露或感染，因为如果抗体反应已经出现，它很可能在一年后消失。

问:T细胞免疫测试如何用于流感大流行?

SL:测量T细胞对SARS-CoV-2的反应有可能让医疗保健提供者了解单个患者是否具有免疫力，也有可能让公共卫生官员了解有多少人感染了SARS-CoV-2，以及有多少人成功或失败地接种了疫苗。仅依靠抗体测试来评估暴露人群，会低估暴露、感染或接种疫苗的人数。首先，抗体免疫力会随着时间的推移而减弱，因此在感染一年后，大多数COVID-19恢复期个体的抗体都是阴性的，尽管他们可能已经有几个月的抗体呈阳性。其次，一些人似乎对SARS-CoV-2暴露或感染做出反应，即产生T细胞反应而不产生抗体反应。

从管理每个人的健康和安全的角度来看，了解他们的T细胞免疫能力可以成为COVID-19“护照”的一个要素，让他们重返工作、学校、公共交通和航空旅行。例如，T细胞免疫预计与免受严重COVID-19的保护有关，并与将SARS-CoV-2传播给他人的能力降低有关。然而，建立T细胞免疫在预测保护和正向传播风险方面的意义将需要大量的研究。

从公共卫生的角度来看，人群中对SARS-CoV-2具有T细胞免疫的个体数量可能是“群体免疫”的一个重要因素。群体免疫是一个术语，描述当免疫个体(受到保护且不会有效传播病毒)的数量达到感染率下降的程度时，人群的免疫水平。如果有T细胞免疫，但对SARS-CoV-2没有抗体免疫的个体有助于群体免疫，那么美国人——或者至少是美国人的一小部分——可能比抗体调查单独表明的更接近群体免疫。对人群T细胞免疫的准确分析有可能预测我们离发展群体免疫还有多远，也有可能指导政策，确定是否以及何时恢复正常的生活方式是可取的。

问:你能跟我们说说TNX-2100测试吗?

SL:TNX-2100皮肤试验旨在使用延迟型超敏反应(DTH)测量T细胞免疫。DTH是抗原特异性T细胞保护的经典措施，已经使用了一个多世纪。TNX-2100皮肤测试由三种不同的合成肽混合物组成，旨在代表SARS-CoV-2病毒的不同蛋白质成分:多抗原肽、刺突肽和非刺突肽。由于根据紧急使用授权(EUA)提供的所有COVID-19疫苗都基于SARS-CoV-2刺突蛋白，因此使用三种不同的肽鸡尾酒是为了区分naïve的人、接种过疫苗的人和COVID-19恢复期的人。

多抗原钉肽Non-Spike肽

COVID-19 naïve未接种疫苗- - -

只接种过狼牙疫苗+ + -

接种疫苗和/或正在康复+ + +

在临床环境中，这三种多肽混合物分别被植入人手臂内表面的不同位置的皮肤中。48至72小时后，感染或接触过SARS-CoV-2的人预计将对所有三种混合物产生反应。T细胞免疫的衡量标准是皮肤隆起、硬化区域的直径，称为“硬结”。预计硬化的直径大致与T细胞对SARS-CoV-2的免疫力大小成比例，类似于它在其他情况下的作用方式，如结核病或结核病，使用“纯化蛋白衍生物”或PPD结核分枝杆菌。

AM:这种测试与其他检测T细胞免疫的方法相比如何?它有什么优势?

SL:TNX-2100的主要潜在优势是，它比其他可用的测试更容易执行，不需要复杂的实验室设备，是一种测量方法在活的有机体内功能性免疫。检测SARS-CoV-2 T细胞免疫的典型方法需要昂贵的、多步骤的样品制备和检测在体外T细胞刺激使用的方法尚未标准化，需要高度专业化的实验室。这些技术包括抽取相对大量的血液，从采集的血液中分离T细胞，在组织培养中用SARS-CoV-2肽刺激分离的T细胞，最后使用复杂的分析方法分析培养的T细胞。在最常见的技术中，称为胞浆内细胞因子染色(ICS)，分析仪器称为多参数流式细胞仪。

TNX-2100皮肤试验的设计采用经典的DTH反应，该反应已用于结核病约120年。DTH皮肤试验不需要专门的技术。这种皮试的设计是在诊所进行的，比如医生办公室、越来越多的零售药房诊所之一，或者以工作为基础的员工健康中心。考虑到程序的简单性和多肽预期的稳定性，它可以在没有自来水或恶劣或极端天气的偏远哨所进行。皮肤测试包括一次测试管理访问和第二次访问医疗保健专业人员测量硬结。在未来，通过充分的验证和测试，第二次就诊可能会被手机图像所取代，该图像可以传输给医疗保健专业人员进行解释和记录。

问:SARS-CoV-2变种可能会影响皮试的表现吗?

SL:还需要研究SARS-CoV-2变体对皮试性能的影响，但我们认为，与抗体反应相比，T细胞对目前识别的变体的反应更有可能是恒定的。到目前为止，这些变体似乎正在发生突变，以改变位于刺突蛋白外部的肽表位，这是抗体结合的地方。相反，T细胞识别的肽表位通常来自蛋白质内部，因为蛋白质需要在T细胞看到它们之前被咀嚼成碎片。两种变体之间潜在T细胞表位的变化数量似乎很小。它们突变的尖刺氨基酸模式表明，这些变体发生突变是为了逃避抗体反应。在武汉型COVID-19恢复期血清中和变异的能力降低的研究中，已经证明了变异在逃避抗体反应方面的成功。总之，这些事实和观察结果表明，皮肤试验将相对不受变异的影响。

AM:在这种检测得到广泛应用之前，还需要采取哪些进一步的步骤?

SL:今年2月，我们收到了美国食品和药物管理局(FDA)关于TNX-2100的B类预研究新药(IND)会议问题的书面回复。本文档为产品开发和临床试验提供指导。TNX-2100还没有被研究，所以下一步是提交IND申请，以获得FDA的批准，在临床测试这项技术。我们Tonix的团队目前正在完成概念验证研究的设计。我们预计这将很快被一个更大的研究跟进。如果测试的表现符合我们的预期，我们相信开发将迅速进行。TNX-2100皮肤测试完全开发完成后，有望为临床医生、患者、雇主和公共卫生官员提供信息，以指导患者护理和公共卫生决策。

问:除了TNX-2100的开发之外，Tonix Pharmaceuticals还通过哪些其他方式参与COVID-19的应对工作?

SL:我们正在研发抗SARS-CoV-2病毒载体活疫苗TNX-1800。TNX-1800是一种经过改造的马痘病毒，被设计用于表达SARS-CoV-2刺突蛋白。最近的DNA分析报告了大约1860年的美国天花疫苗和马痘病毒之间99.7%的共线一致性，我们正在开发作为载体平台的马痘病毒。一种与我们的载体如此相似的疫苗，已经被用作天花疫苗，这一发现支持了人类安全的观点。这也支持了我们的观点，即马痘更接近于爱德华·詹纳(Edward Jenner)在1798年用来接种天花疫苗的疫苗病毒，而不是今天被称为“牛痘”的现代疫苗。我们已与Southern Research公司建立战略合作，开发涉及动物试验的TNX-1800。我们最近宣布，TNX-1800在非人灵长类动物中诱导了对SARS-CoV-2的强烈免疫反应，并保护上呼吸道和下呼吸道免受SARS-CoV-2的挑战。

从制造的角度来看，我们与FUJIFILM Diosynth生物技术公司(FDBT)建立了制造合作伙伴关系，在FDBT位于德克萨斯州的College Station工厂生产TNX-1800。我们最近还宣布计划在马萨诸塞州新贝德福德建立我们自己的工艺开发设施，并在美国国立卫生研究院落基山国家实验室所在地汉密尔顿建立一个疫苗生产设施。

TNX-2100皮肤试验是我们开发和测试TNX-1800疫苗的副产品，因为TNX-1800疫苗旨在引发对SARS-CoV-2的强烈T细胞反应。强烈的T细胞反应的潜在优势包括保护的持久性和在接种疫苗的人随后感染SARS-CoV-2时抑制正向传播。我们对TNX-1800的前景感到乐观，因为爱德华·詹纳的天花疫苗不仅是第一种疫苗，而且仍然是历史上最成功的疫苗。詹纳的疫苗根除了天花，这是迄今为止唯一被根除的传染病。任何策略都不太可能根除SARS-CoV-2，因为人们已经知道它会感染其他各种动物。SARS-CoV-2更有可能成为地方病。因此，我们的短期目标是开发TNX-1800作为成人疫苗，但我们的长期目标是测试和开发TNX-1800作为潜在的儿童疫苗，包括在其他儿童免疫接种中。

Seth Lederman接受了科技网络科学作家Anna MacDonald的采访。188金宝搏备用